nap染色实验报告

nap染色实验报告


2024年1月8日发(作者:)

nap染色实验报告

一、概述

NAP是一种酶,主要存在于成熟中性粒细胞胞质中(中性杆状核粒细胞/中性分叶核粒细胞),在碱性条件下,能分解磷酸酯。

二、原理

Kaplow偶氮偶联法:中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)在PH9.6左右的碱性环境中,能水解基质液中的磷酸萘酚钠,释放出萘酚,后者与重氮盐偶联,生成不溶性的有色沉淀,定位于细胞质酶所在之处。

三、步骤

根据试剂盒说明书:操作→制片→固定→加液→水洗→镜检→记录。

1、结果判断:

根据胞质中有无阳性反应(颗粒/沉淀)

无→积分为0

有→阳性→+(阳性颗粒约占胞质面积1/4)→积分为1

有→阳性→++(阳性颗粒约占胞质面积1/2)→积分为2

有→阳性→+++(阳性颗粒约占胞质面积3/4)→积分为3

有→阳性→++++(阳性颗粒充满胞质)→积分为4

计算:

(1)阳性率

油镜下,连续观察100个成熟中性粒细胞,记录阳性细胞所占百

分率。

(2)积分值

对所有阳性细胞逐个按其反应强度分级,将各级所占的百分率乘以级数,然后相加,即为积分值。

四、参考范围

正常细胞反应,成熟中性粒细胞阳性,其他细胞阴性。

阳性率:30%~70%

积分值:35~100分

备注:试剂和判断标准不同,参考范围不同。

五、临床意义

1、生理变化:

NAP活性可受年龄,性别,应激状态,月经周期,妊娠及分娩等因素影响而发生一定的变化。

2、病理变化:

NAP积分增加:

见于细菌性感染(包括类白血病反应),再生障碍性贫血,某些骨髓增值性肿瘤(如慢性中性粒细胞白血病,骨髓纤维化,真性红细胞增多症,原发性血小板增多症),慢性髓细胞白血病(加速期,急变期),急性淋巴细胞白血病,慢性淋巴细胞白血病,恶性淋巴瘤,骨髓转移癌等。

3、NAP积分下降:

见于慢性髓细胞白血病慢性期,阵发性睡眠性血红蛋白尿症,骨髓增生异常综合征等。

4、疾病鉴别:

慢粒与类白:前者降低甚至为0,后者升高。

细菌性感染与病毒性感染:前者升高,后者正常或略低。

ALL与AML:前者升高,后者正常或略低。

再障与PNH:前者升高,后者降低。

慢性粒细胞白血病:慢性期降低,加速期和急变期升高。


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