2024年5月13日发(作者：vivo手机忘记开机密码怎么办)

ELISA法检测乙肝病毒表面抗原假阳性原因的分析

摘要】目的 探讨ELISA法检测乙肝表面抗原时出现假阳性的原因及对策。方法

随机对220例门诊传染科患者空腹血清选用统一的试剂，相同的酶标仪，操作人

员及采用ELISA法进行乙肝表面抗原检测。结果 出现25例乙肝表面抗原阳性患

者，后有采用乙肝表面抗原金标法进行复检，在25例阳性中有5例为阴性，最

后再将25例表面抗原阳性血清进行乙肝病毒DNA滴度测试，出现5例阴性，并

且和乙肝表面抗原金标法测试的5例相同。结论 ELISA法检测乙肝表面抗原时影

响因素较多，严格控制操作环节是降低乙肝表面抗原假阳性的关键。

【关键词】ELISA法 乙肝表面抗原 假阳性

利用双抗体夹心法是检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）最常用的ELISA法,但由

于标本、检测环节、实验仪器及环境等因素影响,在实际工作中仍然会出现少量的

乙肝表面抗原假阳性结果。本文对220例门诊患者空腹血清标本进行测试乙肝表

面抗原，就出现假阳性结果进行分析,探讨及总结出现假阳性原因及防止对策。

1 资料与方法

1.1 资料 随机对2010年3月至2010年6月来我院门诊传染科220例患者空

腹血清选用统一的试剂，相同的酶标仪，操作人员及采用ELISA法进行乙肝病毒

表面抗原检测。

1.2 方法 采用ELISA法中的双抗体夹心法。试剂选用北京万泰生物药业股份有

限公司生产的乙肝表面抗原检测试剂盒。药品批准文号：国药准字S10980090。

乙肝表面抗原金标法试剂选用艾康生物技术（杭州）有限公司提供的乙型肝炎病

毒表面抗原诊断试剂（胶体金法），试剂均在有效期内，严格遵循试剂操作步骤

及相关作业指导书进行测试。

1.3 仪器 酶标仪选用深圳雷杜有限公司提供的RT-2000i酶标仪及其配套的中

文处理系统。

1.4 标准 阴阳性判定标准是利用RT-2000i酶标仪测试的吸光度值OD值≥COV

为阳性，标本OD值＜COV值为阴性；Cutoff值计算公式：COV=阴性对照平均OD

值×2.1。HBV-DNA含量结果低于检测值考贝数在103以下判定患者乙肝表面抗原

为阴性。

2 结果

对2010年3月至2010年6月来我院门诊传染科220例患者空腹血清进行乙

肝病毒表面抗原测试。结果220例患者中ELISA法检测出25例HBsAg阳性患者。

再利用乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂（胶体金法）试剂条进行复检，结果25

例阳性患者血清出现5例阴性结果。最后再选用HBV-DNA含量测试25例阳性患

者血清，结果出现5例阴性（检测值考贝数＜103），并且和胶体金法测试的阴

性结果相一致。其结果显示在220例患者血清中HBsAg假阳性为5例(5/220,2.3%)。

3 讨论

乙肝表面抗原（HBsAg）是乙肝病毒的外壳蛋白，HBsAg不具有传染性，但它

的出现常伴随乙肝病毒的存在，所以它是已感染乙肝病毒的标志。乙型肝炎是由

于乙型肝炎病毒引起的一种传染病，该病在世界各地广泛流行。也是我国当前流

行最广泛、危害最严重的一种传染病[1]。在我国被乙型肝炎感染的人群高达10%

左右。全国HBsAg阳性者约1.2亿，其中有7800万人发病。目前，国内外对

HBsAg阳性转阴性治疗，缺乏有效的特异性手段。因此加强乙型肝炎的预防工作

极其重要[2]。利用双抗体夹心法是检测乙肝病毒表面抗原（HBsAg）最常用的

ELISA法。但是利用ELISA法监测HBsAg时要注意实验操作过程中的每一个环节，

否则容易出现2%的假阳性[3]。本组220例患者血清利用ELISA法监测HBsAg时，

出现5例假阳性(5/220,2.3%)，与有关学者的研究相接近。因此在经过乙肝病毒表

面抗原金标法和HBV-DNA实验证实后对ELISA法监测HBsAg出现假阳性总结分析

如下。

3.1 实验前的质量控制 在利用ELISA法监测HBsAg实验前要从临床医护及人

员下医嘱和采血开始就要进行检验质量控制。依据患者临床症状需要采集检验血

液标本，但患者出现黄疸、高脂血症及采血方式影响标本出现溶血的因素时，都

要在利用ELISA法监测HBsAg时要倍加注意检测结果与分析，这些因素极易导致

HBsAg出现假阳性，误导检验医师及临床的诊治[4]。

3.2 实验中的质量控制 标本在送到实验室，检验医师要严格执行检验标本接

收制度，核查不合格标本进入检验环节。检验人员在利用ELISA法监测HBsAg时

要详细阅读试剂说明书及掌握ELISA法作业指导书的内容。从加样、洗板、加酶

液、上酶标仪测试及最后判定结果[5]，其中每一步都得具有责任性强，严格每一

步的操作规程，尤其在判定结果时要严格参照吸光度值OD值≥COV为阳性，标本

OD值＜COV值为阴性的判定规则，不可用肉眼进行外观颜色的判读，如此才能

减少因人为因素而造成HBsAg出现假阳性。对于可疑标本再利用乙型肝炎病毒表

面抗原诊断试剂（胶体金法）试剂条进行复检，但金标法属一种检测HBsAg粗筛

试验，其灵敏度高，特异性差不能作为HBsAg阴阳性的判断标准，有条件的实验

室一般不采用。采用金标法只是做一个对比[6]。必要时再选用HBV-DNA含量测

试确诊。

3.3 实验后的质量控制 在确证后发出检验结果时，对HBsAg阳性标本在-20℃

保存至少7d，防备有争议在进行复检，同时要做好相关传染病上报登记及检验科

阳性结果的登记。

综上所述，临床检验中对于患者血清标本中的的HBsAg单独阳性或与乙肝三

系统中的HBsAb同时阳性，均为少见模式，应引检验医师的足够重视。在检测时

最好作重复性试验或者变换方法及试剂进行复查，确保HBsAg检验结果的准确性。

参 考 文 献

[1]朱黎明,朱英杰.少数民族地区孕妇乙肝病毒感染的调查分析.临床肝胆病杂志,2005,4:73-74.

[2]任粉玉,朴熙绪.慢性乙型肝炎的疫苗治疗免疫学机制的探讨.临床肝胆病杂志,2005,4:83-84.

[3]黄秋芳,王微,李永.ELISA检测HBsAg复检结果的分析[J].检验医学,2004,19(4):603.

[4]陈传德,冷霜.ELISA一步法检测HBsAg影响因素分析[J].中国卫生检验杂志,2003,13(3):853.

[5] 叶千红，张丽霞.关于标本因素对ELISA检测结果影响的分析.中国实验诊断学.2003,7:440-

441.

[6]施纪文, 徐简华, 温惠萍. ELISA法和胶体金免疫层析法检测乙肝表面抗原的比较[J].现代检验

医学杂志,2005,20 (5):48-49.