2024年4月17日发(作者：htc型号大全)

Ｗｅｂｓｉｔｅ　ｈｔｔｐ：／／ｘｕｅｂａｏ．ａｈｔｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎ　Ｅ　ｍａｉｌ　ａｈｘｂｂｊｂ＠ｌ　６３．ｃｏｒｎ　

安徽中医学院学报第３２卷第２期２０１３年４月Ｊ（）ＵＲＮＡＩ　（）Ｆ　ＡＮＨＵＩ　ＴＣＭ　）Ｉ　Ｒ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２０１３　

・

实验研究・　

疏肝益阳胶囊对动脉性勃起功能障碍　

大鼠性功能及性腺质量的作用　

王　济　，白明华　，刘保兴　，杨　寅　，杨玲玲‘，王　琦。　

（１．北京中医药大学基础医学院中医体质与生殖医学研究中心，北京　１０００２９；　

２．中日友好医院中医男科，北京　１０００２９）　

［摘要］目的　观察中药疏肝益阳胶裳对动脉性勃起功能障碍（ａｒｔｅｒｉｏｇｅｎｉｃ　ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＡＥＤ）模型　

大鼠性功能及睾丸和附属性腺器官质量的改善作用。方法　选取３月龄成年雄性ＳＤ大鼠５Ｏ只，采用双侧　

髂内动脉结扎法复制ＡＥＤ模型。设假手术组、模型组、西地那非组（每日ｌ０．５　ｍｇ／ｋｇ）、疏肝益阳胶囊大剂　

量组（每日１　ｇ／ｋｇ）、疏肝益阳胶囊小剂量组（每日０．５　ｇ／ｋｇ），每组１Ｏ只，灌胃给药，疗程３０　ｄ。行阿朴吗啡　

（ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎｅ，ＡＰ（））试验检测性功能，取双侧睾丸及附睾、前列腺、精囊腺、球海绵体肌，称湿质量并计算质　

量系数。结果　ＡＰＯ试验显示疏肝益阳胶囊大、小剂量可显著增加ＡＥＤ大鼠３０　ｒａｉｎ内阴茎勃起次数（Ｐ＜　

０．０１）。疏肝益阳胶囊大、小剂量可显著增加ＡＥＤ大鼠睾丸、附睾、球海绵体肌质量系数（Ｐ＜０．０５）。　

结论　疏肝益阳胶囊可明显改善ＡＥＤ大鼠的性功能，并可使睾丸及其附属性器官质量系数显著增加。　

［关键词］疏肝益阳胶囊；勃起功能障碍；性功能；器官质量系数　

［中图分类号－］Ｒ２４６．８３［文献标志码］Ａ［Ｉ）（）ｉ３１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００　２２１９．２０１３．０２．０ｌ７　

囊含０．２５　ｇ疏肝益阳细粉，临用时按照所需剂量称　

取细粉，加０．５　羧甲基纤维素钠充分溶解，再用蒸　

馏水配制成适当浓度混悬液。对照药西地那非粉末　

勃起功能障碍（ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ，ＥＤ）发病　

率总体为１　０　／０ｏ～５２　，严重影响男性生殖健康和生　

活质量　。中医药治疗ＥＤ有着悠久的历史，疏肝　

益阳胶囊是全国名老中医王琦教授根据现代社会男　

性阳痿病『天］，以“阳痿从肝论治”为理论依据研制的　

一

购白郑州荔诺生物科技有限公司，临用时称适量加　

蒸馏水溶解。阿朴吗啡（ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎｅ，ＡＰ（））购自　

Ｓｉｇｍａ公司。　

种中药制剂，已取得国家新药证书。根据疏肝益　

阳胶囊的主要组方原则“疏肝解郁、活血化瘀”，本实　

验采取髂内动脉结扎法复制大鼠动脉性ＥＤ（ａｒｔｅ—　

ｒｉｏｇｅｎｉｃ　ＥＤ，ＥＤ）模型，观察疏肝益阳胶囊对模型大　

Ｌ　３实验器材６倍手术放大镜（天津光学仪器总　

厂）；显微外科手术器材；单孔冷光照明灯；倒置荧光　

显微镜（Ｎｉｋｏｎ　Ｅｃｌｉｐｓｅ）；电子天平（Ｃ－Ｒ一２００）。　

２　方法　

鼠性功能的改善情况及对睾丸和附属性器官质量的　

影响，为研究其作用机制提供依据。　

１　材料　

２．１　分组与模型复制　选取３月龄雄性ＳＤ大鼠　

５Ｏ只，适应性饲养３　ｄ后，经交配实验有正常的勃起　

功能和性功能。随机分为５组，每组ｌ０只。分别为　

假手术组，模型组，西地那非组，疏肝益阳胶囊大、小　

剂量组。　

１．１　实验动物　雄性ＳＤ大鼠，鼠龄３个月，体质量　

２５０￣３００　ｇ，购于中国人民解放军军事医学科学院实　

验动物中心，生产许可证号：ＳＣＸＫ（军）０００７—００４。　

１．２　药物与试刹　疏肝益阳胶囊（贵州益佰医药有　

限责任公司提供，批号：国药准字Ｚ２００３０¨６）由柴　

各实验组以双侧髂内动脉结扎法复制ＡＥＤ模　

型［２　。１Ｏ　水合氯醛腹腔注射麻醉，腹部正中切口　

切开皮肤，分离腹壁肌肉组织，暴露腹主动脉和髂总　

胡、白蒺藜、露蜂房、蛇床子、地龙、水蛭、九香虫、紫　

梢花、远志、肉苁蓉、菟丝子、五味子、巴戟天、蜈蚣、　

动脉，在手术放大镜下沿髂总动脉走行小心分离直　

至髂内动脉，以８－Ｏ线结扎双侧髂内动脉；假手术组　

以同样的步骤分离至暴露双侧髂内动脉，但不予结　

扎，再依次缝合各层组织。手术后观察２周，无感染　

或其他手术并发症。　

２．２　给药　各组均采取灌胃给药。按照每只大鼠　

石菖蒲１５味药组成，每克含生药量５．４８　ｇ，每粒胶　

基金项目：同家中医药管理局王琦名老中医药专家传承工作　

室建设项目；北京中医药薪火传承“３＋３”丁程王琦名　

医传承一Ｔ　作站建设项目　

作者简介：王济（１９７３），女，博十，副主任医师　

通信作者：王琦，ｗａｎｇｑｉ７１０＠１２６．ｃｏｍ　

给药２　ｍｌ／ｄ计算，得出需配药液的浓度。给药剂量　

分别为：西地那非组每日给予西地那非１０．５　ｍｇ／ｋｇ；　

Ｗｅｂｓｉｔｅ　ｈｔｔｐ：／／ｘｕｅｂａｏ．ａｈｔｃｍ．ｅｄｕ．ｃｎ　Ｅ—ｍａｉｌ　ａｈｘｂｂｊｂ＠ｌ６３．ＣＯ１ＴＩ　

安徽中医学院学报第３２卷第２期２０１３年４月ＪＯＵＲＮＡＩ　（）ＦＡＮＨＵＩＴＣＭａ）Ｉ　Ｉ￣ＥＧＥ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２０１３　

疏肝益阳胶囊大、小剂量组分别每日给予疏肝益阳　量组与模型组比较，阴茎勃起次数均显著增加（Ｐ＜　

胶囊１．０、０．５　ｇ／ｋｇ；假手术组和模型组每日给２　ｍｌ　

蒸馏水灌胃。疗程３０　ｄ。　

０．０１）。疏肝益阳胶囊大剂量组与西地那非组勃起次　

数比较，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。见表１。　

表１　各组大鼠阴茎勃起次数比较（　±　）　

２．３性功能测试　给药结束１周行ＡＰＯ试验检　

测性功能。将ＡＰＯ按１００　ｔａｇ／ｋｇ注射于大鼠颈　

项皮肤松软处，记录３０　ｍｉｎ内的大鼠阴茎勃起次　

数。以龟头充血及阴茎体增长、末段阴茎体露出　

为阴茎勃起１次。　

２．４取材、计算睾丸及附属性器官质量系数腹腔　

注：与似手术组比较，＊＊Ｐ＜Ｏ．ｏ１；　

麻醉（方法同上）后依次取下右侧睾丸、附睾、球海绵　

体肌、尿道球腺、前列腺、精囊腺称湿质量后，计算脏　

器系数（脏器质量／体质量比值，单位为ｇ／ｋｇ）。　

２．５　统计学方法　连续型变量以“均数±标准差　

（　±ｓ）”进行统计学描述，采用ＳＰＳＳ　１３．０软件进行　

方差分析，两组之间均数比较采用ＬＳＤ法。以Ｐ＜　

０．０５为差异具有统计学意义。　

３　结果　

与模型组比较，△△Ｐ＜０．０１。　

３．２　疏肝益阳胶囊对ＡＥＤ大鼠睾丸及附属性器　

官质量系数的影响　与假手术组比较，模型组大　

鼠睾丸及各附属性器官质量系数显著降低（Ｐ＜　

０．０１）；与模型组比较，各治疗组大鼠睾丸及附睾　

质量系数，疏肝益阳胶囊大、小剂量组球海绵体　

肌质量系数，以及西地那非组和疏肝益阳胶囊大　

剂量组精囊腺质量系数均显著增加（Ｐ＜０．０５）；　

各治疗组之间上述指标比较，差异均无统计学意　

义（Ｐ＞０．０５）。见表２。　

３．１　疏肝益阳胶囊对ＡＥＤ大鼠性功能的影响　

大鼠颈部注射ＡＰｏ后，先诱导出现哈欠，然后出现阴　

茎勃起。模型组与假手术组比较，阴茎勃起次数显著　

减少（Ｐ＜０．０１）；西地那非组，疏肝益阳胶囊大、小剂　

表２　各组大鼠睾丸及附属性器官质量系数比较（　±Ｓ）　

注：与假手术组比较，＊＊Ｐ＜０．０１；与模型组比较，△Ｐ＜０．０５。　

４讨论　

中医学认为阴茎勃起是由一系列脏腑、经络及　

气血津液相互协调作用的结果，而尤其与肝肾密切　

振痿的功效。　

在前期临床试验中，采用多中心、随机、双盲、安　

慰剂及阳性药物对照及疏肝益阳胶囊开放试验对　

５００例患者进行４周的临床观察，结果发现疏肝益　

阳胶囊双盲治疗组及开放治疗组的总有效率及总显　

相关。中医男科对ＥＤ（阳痿）的发生，传统观念多　

责之于肾。王琦教授根据现代社会男性ＥＤ发病的　

实际情况，提出ＥＤ发病因于肝者居多，应从肝论　

治口］。肝藏血，主疏泄，主宗筋，肝血在肝气的疏导　

下对阴茎的快速充盈是阴茎勃起的物质基础　ｊ。故　

而突破了在脏腑定位上以“肾”为中心，在病机病因　

上以“虚”为重点，在治疗上以“补肾壮阳”为主导的　

效率均显著高于安慰剂组和锁阳补肾组。同时在勃　

起改善时间、阴茎硬度测试环试验恢复等方面均显　

著高于锁阳补肾及安慰剂组，未发现不良反应。］０５　

例痊愈患者中１００例患者３个月的性交成功率大于　

８０　。结果显示，疏肝益阳胶囊对ＥＤ患者具有良　

好的治疗效果　。　

为进一步研究疏肝益阳胶囊的作用机制，课题　

组以摘除一侧性腺的方式复制去势ＥＤ大鼠模型，　

传统观念，认为ＥＤ最基本的病理变化是肝郁肾虚　

血瘀，三者有机联系，互为因果，共同作用。根据上　

述理论研制的疏肝益阳胶囊由白蒺藜、柴胡、地龙、　

露蜂房、蛇床子等１５味中药组成，方中白蒺藜、柴胡　

调达肝气，疏肝解郁；地龙通利经络；露蜂房、蛇床子　

温肾壮阳。诸药合用具有疏肝解郁、活血通络、补肾　

研究发现，疏肝益阳胶囊可以改善去势大鼠的性欲　

及射精功能，提高抗疲劳能力，并可提高去势大鼠雄　

激素、促肾上腺皮质激素水平，缩小阴茎静脉管腔直　

５６　安徽中医学院学报第３２卷第２划２０１３年４月　

Ｊ（）ＵＲＮ　（　ＡＮＨ　ＬｊＩ　ＴＣＭ　）ｌＪＩ　ＥＪＥ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２（）１３　

ｆ　』支减慢…　；　流　Ｊ蔓　以　侧髂Ｉ　Ｉ、】动脉结　斛郁、活ｍ化瘀、补　｝＝｝振萎”为主嗄治　的疏Ｈ十益…　

扎法造成大　Ａ　ＥＤ模型。经榆测　茎海绵体组织　

－

胶囊对ＥＤ的疗效．并揭示ｒ其作用机制。『十１于巾　

药作ｆ｛｛是多靶点ｆ　．故疏肝益阳胶袁的作川机制尚　

需进一步研究。　

参考文献：　

ｒ门Ｃａｓｌ　ｒｏ　ＲＰ．Ｈ　ｎｄｎｄｅｚ　ＰＣ，（’ａｓｉｌｄａ　ＲＲ，ｅｌ　ａ１．Ｅｐｋｌｅｍｉ　

氰化氰介　（ｎ；１　ｒｉｃ　ｏｘｉ（　ｌｔ　ｓｙｎｌｈａｓ（，，Ｎ（）Ｓ）　环磷　

１ｌ１）Ⅲ　…‘ｍｏｐｈｏｓｐｈａｔｅ，ｃ（　ＭＰ）　酸【　忤ｔ　ｃⅥ　

通路的幕　干¨芏ｆｉＩ　Ｉ表达水　，证实疏肝益阳胶囊可　

增『ＪＩｌ　ＡＥＤ大鼠海绵体组织Ｎ（）Ｓ／ｃＧＭＰ通路分子　

表达，改善『｛ＪＪ拳海绵体平滑肌舒张功能［＝７　Ｊ。同时，疏　

肝益阳胶囊ｆ１丁　著增加ＡＥＤ大鼠阴茎海绵体组织　

血管内皮生长　子（ｖａｓｃｕｌａｒ　ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　

ｆａｄＯＦ，ＶＥＧＦ）、胰岛素样牛长冈子（ｉｎｓｕｌｉｎ　ｌｉｋｅ　

ｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ：ｒｉｓｋ　ｌａｃｔｏｒｓｊ　Ｊ］．Ａ　ｒｃｈ　Ｅｓｐ　

Ｕｒｏ１．２０ｌ　０，６３（８）：６３７　６３９．　

ｒ２］Ｅ１一Ｓａｋｋａ　Ａ，Ｙｅｎ　ＴＳ，Ｉ　ｉｎ　ＣＳ，ｅｔ　ａ１．　Ｆｒａｕｍａｔｉｃ　ａｒｌｃｒｉｏ　

ｇｅｎｉｃ　ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ：ａ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　Ｊ　．１　ｎ１．Ｉ　Ｉｎｌｐ（）ｔ　

Ｒｅ８．２００ｌ，１３（３）：１６２　１　７１．　

ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ，ＩＧ－Ｆ）和Ａｋｔｌ表达，对血管内皮功能　

具有改善作用　。并可　著降低ＡＥＤ大鼠血浆内　

皮素一１（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ　１，ＥＴ一１）含量和阴茎组织ＥＴ基　

因表达，增加阴茎组　基因表达［９　Ｊ。前期研　

究结果提示，疏肝益阳胶囊发挥治疗作用的机制可　

［３］王琦．王琦男科学［Ｍ］．２版．郑州：河南科学技术川片反　

衬：，２００６：４９．　

［４］王琦．宗筋论ＥＪ］．中华中医药杂志，２００６，２１（１０）：５７９　５８１．　

［５］工琦，杨吉相，李同信，等．疏肝益阳胶囊治疗勃起功能　

障碍多中心随机对照试验［Ｊ］．北京中医药大学学报，　

２００４，２７（４）：７２—７５．　

能是改善了阴茎组织的血管内皮和平滑肌功能，使　

性兴奋刺激下阴茎血管平滑肌舒张、血管扩张、血流　

充盈而产生勃起或使原有勃起功能增强。　

６　王琦．倪平。吴　平，等．疏肝益阳胶囊治疗勃起功能障碍的　

作用机理研究ｌＪ］．中国中药杂志，２００５．３０（１）：５８　６２．　

７］Ｗａｎｇ　Ｊ，Ｗａｎｇ　Ｑ，Ｉ．ｉｕ　Ｉ３，ｅｔ　ａ１．Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｈｅｒｂａｌ　ｆｏｒｎｕｉ　

ｌａ．Ｓｈｕｇａｎｙｉｙａｎｇ　Ｃａｐｓｕｌｅ。ｉｍｐｒｏｖｅｓ　ｅｒｅｃｔ　ｉｌｅ　ｆｕｎｃｔｋ）ｉＩ　ｉｎ　

本实验仍运用髂内动脉结扎法复制ＡＥＩ）模　

型，观察模型大鼠阴茎勃起功能。ＡＰＯ诱导实验显　

示所有ＡＥＩ）大鼠阴茎勃起次数较假手术组显著减　

少．Ｉ＇２１）发　ｋ率为１　Ｏ０　。疏肝益阳胶囊大、小剂量　

组大鼠　茎　起　数Ｊ－９｛ｌＪ！箸增加，且大剂量组与两　

地＝７】ｌ５非比较。差异尤统’ｌｆ学意义　眄地川：　Ｉ１前　

ｍａｌｅ　ｒａｔｓ　ｂｙ　ｍｏｄｕｌａｔｉｎｇ　Ｎ（）ｓ—ｃＧＭＰ　ｍｅｄｉａｔｏｒｓ　Ｌ¨．Ｕ　

ｒｏｌｏｇｙ．２０１　２，７９（１）：ｅ２４１　２　２１１　６．　

８　乇济，王琦．刘保兴，等．疏肝益　胶蠼列动脉忖勃起ＪＪ＿Ｊ　

能障碍大鼠ＶＥＧＦ、ＩＧＦ及Ａｋｔｌ激酶表达的影响『…．　

中华　科学杂志，２（）１　２，ｌ８（２）：８６　９０．　

西医治疗Ｅ１）的一线药物　．揣，Ｊ：疏　

Ｅ１）具有较好的疗效．　

牡《ｌＪ　

一－９　Ｅ济．刈保兴，李东桓，等．疏ＪＪ丁益Ⅲ胶睫对ｍ僻性勃起　

ｊ　ＡＥｌ　Ｊ模　ｕ是通过髂内　

ＪＪＪ能障　赶鼠ＥＴ和ＣＸ４３表达的影响［Ｊ　Ｊ。［ｆ１华＿ｆ１医约　

杂志，２０¨，２６（１２）：１５】７．　

＿】０］Ｔｕｒｋｏ　ＩＶ，Ｂａｌｌａｒｄ　ＳＡ，Ｆｒａｎｃｉｓ　ＳＨ，ｅｔ　ａ１．ＩｎｈｉｂｉｔｉｏＩ】　

ｏｆ　ｃｙｃｌｉｃ　ＧＭＰ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｃｙｃｌｉｃ：ＧＭｔ　ｓｐｅｃｉｆｉｃ　ｐｈｏｓｐｈｏｄｉｅｓ　

动脉结扎阻断ｒ　ＩＪ；ｊ　和盆　绀织器　’的血液供应，　

闪此，在复制ＥＤ的　时造成了模型大鼠睾丸及性　

腺附属器官的萎缩。本实验结果提示。疏肝益阳胶　

囊ｉＴ以　著改善模删大鼠睾丸、附睾、球海绵体肌、　

精丧腺的质　．埘前列腺、　道球腺仃一定的作用，　

地ｊＪＩ５　Ｉ卜　收淳性器仃质量方　

比较术　示＿１Ｊ　Ｊ｛Ｉ　势。以＿Ｊ：研究　

ｔｅｒａｓｅ（　Ｆｙｐｅ　５）ｂｙ　ｓｉｌｄｃｎａｆｉｌ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓＥＪ￣．　

Ｍｏｌ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，１　９９９，５６：１　２４　ｌ　３０．　

（收稿日期：２０１　２（）９　２４）　

蹄Ｊ｛｝‘益阳胶囊　

汁实以“疏肝　

Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｓｈｕｇａｎｙｉｙａｎｇ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｏｎ　Ｓｅｘｕａｌ　Ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｓｅｘ　Ｇｌａｎｄ　Ｗｅｉｇｈｔ　ｉｎ　

Ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　Ａｒｔｅｒｉｏｇｅｎｉｃ　Ｅｒｅｃｔｉｌｅ　Ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ　

ＷＡＮ（；‘，　，Ｉ３ＡＩ　Ｍｉｎ￣’，Ｊ““　，，　，　ｊ；川＇　？。　（　Ｙｉｎ　，ｙＡＮＧ　Ｌｉｎｇ　ｌｉｎｇ　，Ｖｌ　』＼，Ｇ　Ｑ　

（１．［ｑｅｓｅａ￣　ｃｈ（Ｔｅｎｌｅｔ　，（Ｊ，　＿，、ｒａｄｉｉ　ｔⅢ　一，《：　ｉ　、　Ｍｅｄｉｃｉ￣　Ｃ，ｅｓｔｒｉｔｕｔｉｏｎ　ａｎｄ　Ｒｅｐｒｏｄｕ￣ｔｉ　ｕｅ＇Ｍｅｄｉ　ｅ　ｉｎｅ，Ｓ（ｈ００［０Ｊ　

Ｂａ　ｓｉ｛Ｍｅｄｉ　ｉｎｅ，１３ｅ１

ｉｎｎ　Ｕ７ｔｉ　ｔ，Ｊ／

ｙ．）／Ｃｈｉ，ｌＵＳｔ＂、７　ｆ／¨ｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ　

．　

．

】０００２９，Ｃｈｉｎａ；２．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｆＪ／　

Ｔ（／Ｍ　Ａｎｄｔ　ｏｌｏｇｙ，Ｃｈｉｎａ－Ｊａｐｏ．ｎ　，‘　ｆ　ｍｌｓｈｉｌ，　ｈ，．ｓｐｉｔ　ｒ　／．『ｊｌ”，ｉｎｎ　ｌ０００２９，Ｃｈｉｎａ）　

［Ａｂｓｔｒａｃｔ］Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｂｓｅｒｖｅ　ｔｈｅ　ｒ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｓｈｕｇａｎｙｉｙａｎｇ（ｓ（；ＹＹ）Ｃａｐｓｕｌｅｓ（ｆｏｒ　ｄｉｓｐｅｒｓｉｎｇ　ｓｔａｇｎａｔｅｄ　

ｌｉｖｅｒ　ｑｉ　ａｎｄ　ｎ（）ｕｒｉｓｈｉｎｇ　ｙａｎｇ）（）ｎ　ｔｈｅ　ｘｕａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　１　ｈｃ　ｗｅｉｇｈｔｓ　ｏｆ　ｔｅｓｔｅｓ　ａｎｄ　ａｃｃｅｓｓｏｒｙ　ｓｅｘ　ｇｌａｎｄｓ　ｉｎ　

ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ａｒｔｅｒｉｏｇｅｎｉｃ　ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｍ’“ｆ）ｎ（ＡＥＩ））．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｉｈｙ　ｍａｌｅ　Ｓｐｒａｇｕｅ—Ｄａｗｌｅｙ　ｒａｔｓ　ａｇｅｄ　３　

ｍｏｎｔｈｓ　ｗｅｒｅ　ｓｅｌｅｃｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ．Ｂｉｌ　ｅｒａｌ　ｉｎｔｅｒｎａｌ　ｉｌｉａｃ　ａｒｔｅｒｙ　ｌｉｇａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｕｓｅｄ　ｔｏ　ｉｎｄｕｃｅ　ａ　ｒａｔ　ｍｏｄｅｌ　ｏｆ　

Ｗｅｂｓｉｔｅ　ｈｔｔｐ：／／ｘｕｅｂａｏ．ａｈｔｃｍ．ｅｄｕ．ＣＦＩ　Ｅ—ｍａｉｌ　ａｈｘｂｂｊｂ＠１６３．ｃｏｒｎ　

安徽中医学院学报第３２卷第２期２０１３年４月ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＮＨＵＩＴＣＭＣ／）ＬＬＥＧＥ　Ｖｏ１．３２　Ｎｏ．２　Ａｐｒ．２０１３　５７　

千金藤碱抑制非小细胞肺癌Ａ５４９细胞生长和转移以及　

对血红素加氧酶一１和表皮生长因子受体基因表达的影响　

马克龙　，汪远金　，周　会　，李　璐　，张腾跃　，罗晓莹。　

（１．安徽中医学院中西医结合临床学院，安徽合肥　２３００３８；２．安徽省立医院，　

安徽合肥　２３００３２；３．上海交通大学医学院上海市肿瘤研究所，上海　２０００３２）　

［摘要］目的　探讨千金藤碱抑制肺癌细胞Ａ５４９生长、迁移和侵袭的作用以及对血红素加氧酶一１（ｈｅｍｅ　ｏｘｙ—　

ｇｅｎａｓｅ一１，ＨＯ－１）和表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ　ｇｒｏｗｔｈ　ｆａｃｔｏｒ　ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ＥＧＦＲ）基因表达的影响。　

方法　甲基噻唑基四唑（ｍｅｔｈｙｌ　ｔｈｉａｚｏｌｙｌ　ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）比色法检测千金藤碱对肺癌细胞的细胞毒性，　

观察其对Ａ５４９细胞生长的抑制作用，并用倒置显微镜观察千金藤碱处理不同时间内Ａ５４９细胞的形态变　

化；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ和侵袭实验检测Ａ５４９细胞迁移和侵袭能力；ＲＴ—ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ法分别检测Ａ５４９细胞　

内ＨＯ一１和ＥＧＦＲ基因的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平。结果　千金藤碱能够抑制肺癌细胞Ａ５４９细胞的生长，　

细胞活力随着作用浓度的增加和时间的延长明显降低；１０　ｇ／ｍｌ千金藤碱处理２４　ｈ后，Ａ５４９细胞发生体积　

变小、皱缩变圆和染色体固缩等现象；与对照组相比，千金藤碱（＞５．０　ｇ／ｍ１）可使穿过隔膜和穿过基质胶的　

Ａ５４９细胞数明显减少（Ｐ＜０．０５）。１０．０　ｇ／ｍｌ千金藤碱明显降低Ａ５４９细胞中ＨＯ一１和ＥＧＦＲ基因的ｍＲ—　

ＮＡ和蛋白表达水平（Ｐ＜０．０５）。结论　千金藤碱可抑制肺癌细胞的增殖，降低Ａ５４９细胞的迁移和侵袭能　

力，下调Ａ５４９细胞的ＨＯ一１和ＥＧＦＲ基因的表达水平，且作用效果具有一定的时间和浓度依赖性。　

［关键词］千金藤碱；非小细胞肺癌；Ａ５４９．细胞；血红素加氧酶一１；表皮生长因子受体　

［中图分类号］Ｒ２８５．５　［文献标志码］Ａ　ＦＤＯＩ￣１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００—２２１９．２０１３．０２．０１８　

非小细胞肺癌（ｎｏｎ—ｓｍａｌｌ　ｃｅｌｌ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ，　

（ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ　Ｅ２一ｒａｌａｔｅｄ　ｆａｃｔｏｒ　２，Ｎｒｆ２）表达并使　

其在核内大量积聚［４］，进而激活下游基因（血红素加　

氧酶一１（ｈｅｍｅ　ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１，ＨＯ一１）、烟酰胺腺嘌呤　

二核苷酸脱氢酶，醌一１（ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ　ｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，　

ｑｕｉｎｏｎｅ　１，ＮＱＯ１）和谷胱甘肽（ｇｌｕｔａｔｈｉｏｎｅ，　

ＮＳＣＬＣ）是我国最常见的恶性肿瘤，其发病率和病　

死率位于各种肿瘤的第一位口　］。肺癌的演化和进　

展与肿瘤细胞内氧稳态失衡密切相关ｌ３］。ＮＳＣＬＣ　

细胞内严重氧化应激状态和活性氧（ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙｇｅｎ　

ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）负荷会诱导核因子Ｅ　相关因子２　

ＧＳＨ））的表达＿５］，不仅导致细胞增殖和凋亡能力的　

改变，还可影响肿瘤细胞的微环境，提高肿瘤细胞的　

基金项目：国家自然科学基金项目（８１２０１５７６）；上海市肿瘤　

研究所青年学者资助项目（ＳＢ０９０８）；安徽省高等学校　

省级自然科学研究项目（ＫＪ２０１３Ｚ１８４）；安徽中医学院　

自然科学研究基金项目（２０１２ｚｒ００８）　

作者简介：马克龙（１９７９一），男，博士，讲师　

侵袭性，促进肿瘤的转移＿６。］。因此，从氧化应激方　

面研究ＮＳＣＬＣ侵袭和转移的分子机制，对于肺癌　

的治疗研究具有重要的意义。　

千金藤碱是一种天然的植物生物碱，主要来自　

中药千金藤属植物千金藤和地不容。既往研究表明　

ＡＥＤ．Ｔｈｅ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｎｄ　ｅｑｕａｌｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ　ｓｈａｍ　ｏｐｅｒａｔｉｏｎ　ｇｒｏｕｐ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｓｉｄｅｎａｆｉｌ　

（１０．５　ｍｇ／ｋｇ　ｄａｉｌｙ）ｇｒｏｕｐ，ｈｉｇｈ—ｄｏｓｅ　ＳＧＹＹ　Ｃａｐｓｕｌｅ（１　ｇ／ｋｇ　ｄａｉｌｙ）ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｌｏｗ—ｄｏｓｅ　ＳＧＹＹ　Ｃａｐｓｕｌｅ　

（０．５　ｇ／ｋｇ　ｄａｉｌｙ）ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ　ｒｅｃｅｉｖｅｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ　ｂｙ　ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ　ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　３Ｏ　ｄ．　

Ｔｈｅ　ｓｅｘｕａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ｉｎ　ｅａｃｈ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｅｖａｌｕａｔｅｄ　ｂｙ　ａｐｏｍｏｒｐｈｉｎｅ（ＡＰＯ）ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｂｉｌａｔｅｒａｌ　ｔｅｓｔｅｓ　

ａｎｄ　ｅｐｉｄｉｄｙｍｉｄｅｓ，ｐｒｏｓｔａｔｅ，ｓｅｍｉｎａｌ　ｖｅｓｉｃｌｅ，ａｎｄ　ｂｕｌｂｏｃａｖｅｒｎｏｓｕｓ　ｍｕｓｃｌｅ　ｏｆ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ；ｔｈｅ　ｗｅｔ　

ｗｅｉｇｈｔ　ｏｆ　ｅａｃｈ　ｏｒｇａｎ　ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｗｅｉｇｈｔ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｗａｓ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ＡＰＯ　ｔｅｓｔ　

ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ　ａｎｄ　ｌｏｗ－ｄｏｓｅ　ＳＧＹＹ　Ｃａｐｓｕｌｅ　ｇｒｏｕｐｓ　ｈａｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｍｏｒｅ　ｔｉｍｅｓ　ｏｆ　ｐｅｎｉｌｅ　ｅｒｅｃｔｉｏｎ　

ｗｉｔｈｉｎ　３０　ｍｉｎ（Ｐ＜０．Ｏ１）ａｎｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｗｅｉｇｈｔ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｅｓｔｅｓ，ｅｐｉｄｉｄｙｍｉｄｅｓ，ａｎｄ　ｂｕｌｂｏｃａｖｅｒｎｏｓｕｓ　

ｍｕｓｃｌｅ（Ｐ＜Ｏ．０５），ａｓ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　ＳＧＹＹ　Ｃａｐｓｕｌｅｓ　ｃａｎ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ　

ｓｅｘｕａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｗｅｉｇｈｔ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　ｏｆ　ｔｅｓｔｅｓ　ａｎｄ　ａｕｘｉｌｉａｒｙ　ｓｅｘ　ｇｌａｎｄｓ　ｉｎ　ｒａｔｓ　ｗｉｔｈ　ＡＥＤ．　

［－Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ］Ｓｈｕｇａｎｙｉｙａｎｇ　Ｃａｐｓｕｌｅ；ｅｒｅｃｔｉｌｅ　ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｓｅｘｕａｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ；ｗｅｉｇｈｔ　ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔ　ｏｆ　ｏｒｇａｎ