2024年3月15日发(作者：)

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864

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光明中医

2021

年

3

月第

36

卷第

6

期

CJGMCM March 2021. Vol 36.6

基于网络药理学研究胆舒胶囊治疗慢性

胆囊炎的机制

冯炜业柯路琳

A

摘要：目的探究胆舒胶囊医治慢性胆囊炎的分子机制。方法胆舒胶囊中主要活性成分是薄荷素油，其为薄荷的挥发油。

因此本研究依托

TCMSP

数据平台，以

OB

530%和

Dl

^

O

. 18为条件，同时结合文献筛选薄荷的有效活性成分，集合疾病靶点数据

库探究薄荷治疗慢性胆囊炎的靶点。利用

String

平台获得交集靶点

PPI

网络

,Cytoscape

3. 7. 2软件绘制“薄荷-有效活性成分-交

集治疗靶点-疾病”网络,

R

语言软件及

clusterProfiler

等数据包对治疗靶点进行

GO

富集分析及

KEGG

通路分析。结果从薄荷中

筛选得到12个有效活性成分，药物有效活性成分与疾病的交集靶点共36个，其中关键乾点包括

VEGFA

、

AKT

1、

EGFR

、

TNF

、

MAPK

3、

PTGS

2、

MMP

9、

MMP

2、

MP

0、

HIF

1

A

等；分别参与了细胞对氧化的应激反应、对金属离子的响应、平滑肌细胞增殖的正调控、

肢原代谢等生物进程；分析结果涉及癌症、

TNF

、

RelaXin

、磷酸酯酶

D

、

VGEF

、

HIF

-1等信号通路。结论研究分析结果显示胆舒肢囊

经过多组分-多靶点-多通路发挥治疗作用，可能主要通过抗炎镇痛、解痉、利胆、抗菌等方面来治疗慢性胆囊炎。

关键词：胆舒肢囊；薄荷；慢性胆囊炎；网络药理学

doi

：

10. 3969/j. issn. 1003-8914.2021.06.006

文章编号：

I003-8914(2021)-06-0864-05

慢性胆囊炎为相当常见的消化系统疾病，多由胆

结石所致胆囊壁炎症，或胆汁瘀积、感染导致急性胆囊

炎反复发作拖延不愈而致[1]。这几年，中医药在医治

慢性胆囊炎上发挥了重要作用，在一定程度上补充了

西药治疗疗效不佳的情况。

胆舒胶囊中主要活性成分为薄荷素油，其为新鲜

的唇形科薄荷的茎和叶经一系列加工获得的挥发油。

薄荷是传统的食药两用植物，具有抑菌、抗炎、止痛、抗

癌、解痉等生物活性，临床上可将其为单方或复方治疗

慢性胆囊炎，但在薄荷治疗慢性胆囊炎的分子机制上

的研究报道甚少。本文基于网络药理学方法，筛选出

胆舒胶囊中君药薄荷的主要有效活性成分和发挥作用

的靶点，探究慢性胆囊炎的已知疾病靶点，分别绘制

件；

clusterProfiler

等数据包等。

2方法

2.1主要活性成分及作用靶点的筛选基于

TCMSP

平台，“薄荷”为关键词，选择口服生物利用度（〇

B

)>

30%并且类药特性（

DL

) >0. 18作为筛选条件[2]，同

时结合杨倩[3]的报道，获得相关的化合物成分。将筛

选后的化学成分导人

Pubchem

服务器，得到化学成分

2

D

结构的

SDF

文件。最后，运用

Swiss

target

predict

数据库，导人化学成分的

SDF

文件，选择物种为“智

人”，选择

Probability

值> 0的耙点，剔除未获得耙点

的成分，剔除重复靶点，获取活性成分靶基因，并经过

Uniprot

蛋白数据库对靶基因进行注释。

2.2疾病

|E

点的收集分别在

GeneCards

及0

MIM

数据库、以“

chronic

cholecystitis

”为关键词，搜集与慢

性胆囊炎发病的相关靶基因，合并2个数据库疾病靶

点，剔除重复值,获得慢性胆囊炎疾病靶点。

2.3

PPI

网络图的绘制与分析运用

Venny

2. 1.0

软件将薄荷活性成分靶点与慢性胆囊炎疾病靶点进行

交集，得到胆舒胶囊医治慢性胆囊炎的治疗靶点。将

获得的治疗靶点上传

String

在线数据库，得到蛋白互

作网络，并对网络图中的核心基因进行分析。

2.4 “薄荷-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病”

网络图的构建将薄荷、有效活性成分、交集治疗靶

点、疾病间相互关系导人

Cytoscape

3.7.2软件，构建

“薄荷-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病”网

络图。

2.5

GO

与

KEGG

富集分析依托

Bioconductor

数

PPI

及“薄荷-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病”

网络图，并进行分析；依托

Bioconductor

数据库，运用

R

语言软件及

clusterProfiler

等数据包对粑点基因本体

(

GO

)的生物进程（

BP

)、分子功能（

MF

)、细胞成分

(

CC

)3个水平及

KEGG

信号通路进行分析，为胆舒胶

囊治疗慢性胆囊炎分子机制的进一步探索提供参考。

1材料

TCMSP

数据分析平台；

Pubchem

数据库

；Swiss

target

predict

数据库

；GeneCards

数据库；0

MIM

数据

库；

Uniprot

数据库；

String

数据库

；Venny

2. 1. 0软件；

Cytoscape

3. 7. 2 软件

；Bioconductor

数据库

；R

语言软

作者单位：福建医科大学附属第一医院药学部（福建福州350005)

A

通讯作者：

E-mail

:44437449@

qq

.

com

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.

据库，

R

语言软件及

clusterProfiler

等数据包对胆舒胶

囊治疗靶点的生物进程、分子功能、细胞成分3个水平

进行

GO

富集分析；同样方法进行

KEGG

富集分析，

R

语言绘制

KEGG

信号通路富集分析高级气泡图，以揭

示胆舒胶囊治疗慢性胆囊炎的分子机制。

3结果

3.1药物靶点及疾病靶点的确定

TSMCP

平台检索

得到薄荷化学成分有164个，符合筛选条件的化学成

分10个，分别为金柑苷、金合欢素、蒙花苷、豆留醇、谷

甾醇、柚皮素、芦荟大黄素、圣草酚、芫花素、木犀草素；

结合文献报道薄荷挥发油含量高的4个活性成分，分

别是

L

-薄荷酮、胡椒酮

、L

-薄荷醇、胡薄荷酮；在

Swiss

target

predict

数据库剔除未获得成分对应耙点的

芦荟大黄素以及未与疾病靶点获得交集的胡薄荷酮，

筛选出薄荷化学成分12个，薄荷作用靶点270个，见

表1。经过

GeneCards

与

OMIM

数据库检索，整合获得

慢性胆囊炎疾病靶点502个，运用

Vermy

2_ 1.0软件

取薄荷与慢性胆囊炎疾病靶点交集，见图1。得到治

疗靶点36个，见表2。

表1薄荷关键化合物

口服生

ID

用

药物相相对分

序号

英文名称

活性成分物利

度/%

似性子量

1

MOL

011616

fortunellin

金柑苷

35.650. 74592.60

2

MOL

001689

acacetin

金合欢素

34.970.24284.28

3

MOL

001790

linarin

蒙花苷

39. 840.71592. 60

4

MOL

002881

diosmetin

香叶木素

31. 14

0. 27300. 28

5

MOL

000359

sitosterol

谷甾醇

36.910. 75

414.79

6

MOL

004328

naringenin

袖皮素

59.290. 21272. 27

7

MOL

005190

eriodictyol

圣草酚

71.790.24

288. 27

8

MOL

005573

genkwanin

芫花素

37. 130. 24

284. 28

9

MOL

000006

luteolin

木犀草素

36. 160. 25286.25

10

MOL

0007151

-menthone

L

-薄荷酮

57.900.03154.28

11

MOL

007330

menthol

L

-薄荷醇

43.310. 03156.28

12

MOLO

11848

d-piperitone

胡椒酮

48. 750. 03

152. 26

薄荷靶点 慢性胆囊炎靶点

图1韦恩图

表2薄荷治疗慢性胆蠹炎的关键靶点

序号

基因符号

序号基因符号

序号

基因符号

1

TNF

13

MMP

225

CYP

2

C

9

2

XDH

14

TERT

26

PIK

3

CA

3

AKR

1

B

1

15

EGFR

27

F

3

4

CA

916

F

228

VEGFA

5

PTGS

217

DAPK

129

CTSL

6

LGALS

318

MP

0

30

HIF

1

A

7

ABCB

1

19

MMP

331

TYMP

8

KIT

20

AKT

132

PIK

3

CG

9

CFTR

21

G

6

PD

33

SHH

10

ARG

122

SLC

6

A

434

NR

1

H

4

11

GL

01

23

PPARG

35

SLC

6

A

3

12

MMP

9

24

PTGS

1

36

MAPK

3

3.2

PPI

网络将治疗靶点上传String数据库，物种

设置为“智人”，选择medium confidence(0. 400),隐藏

离散点，得到靶点相互作用网络图，见图2。其中节点

代表治疗靶点，“边”代表治疗靶点之间的关联，其粗

细用结合分数表示，“边”越粗结合分数值越大，代表

其结合度越大。由

R

语言软件绘制出节点数排名前

20的核心基因条形图，横坐标为节点数，纵坐标为基

因symbol。见图3。

图2薄荷靶点蛋白相互作用网络图

图3蛋白互作核心基因柱状图

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3.3 “薄荷-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病”

网络图应用

Cytoscape

软件构建薄荷治疗慢性胆囊

炎的药物-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病相互

作用网络图，从而间接体现了胆舒胶囊治疗慢性胆囊

炎多组分、多靶点协同作用的特点。见图4。

3. 4 GO富集分析采用

UniProt

数据库对基因

symbol

进行

ID

转换，依托

Bioconductor

数据库，运用

R

语言软件及

clusterProfiler

等数据包，设置

pvalueCutoff

与

qvalueCutoff

的值为0. 05 ,从生物进程、分子功能、

细胞成分3个水平对36个关键靶点进行分类富集分

析，

GO

富集结果包括细胞对氧化的应激反应、对金属

离子的响应、正向调节平滑肌细胞的增殖、胶原代谢过

程等生物进程；蛋白磷酸酶、丝氨酸水解酶活性、过氧

化酶活性等分子功能；膜筏、膜微结构域、肥大细胞颗

粒等细胞成分。

3.5 KEGG富集分析利用上述的基因ID，同样依

托

Bioconductor

数据库，利用

R

语言软件及

clusterProfiler

等数据包，设置

pvalueCutoff

与

qvalueCutoff

的值为0.〇5进行

KEGG

信号通路分析,

包括癌症通路、

TNF

信号通路、

Relaxin

信号通路、磷酸

酯酶

D

信号通路、

VGEF

信号通路、缺氧诱导因子1信

号通路等代谢通路。取排名前20的

KEGG

信号通路

绘制高级气泡图。见图6。

图4薄荷-有效活性成分-交集治疗靶点-疾病

相互作用网络图

Proteoglycans In cancer

Bladder cancer

Central carbon metabolsm in cancer

AGE-RAGE slgnalng pathway In diabetic compications

TNF signaling pai^ay

Rdaxin signaling pathway

Ruid shear stress and atherosclerosis

Phospholipase D signaling pathway

Gastric cancer

Kaposi sarcoma-assoclaled herpesvirus infection

Prostate cancer

Endocrine resistance

HIF-1 signaling pathway

Platelet activation

Autophagy - animal

VEGF signaling pathway

Acute mydoid leukemia

Renai cel! carcinoma

Pancreatic cancer

EGFR tyrosine kinase inhibitor resistance

•

•

•

•

•

•

0.150*20 0.25

GeneRatio

图6

KEGG

通路富集分析高级气泡图

4讨论

网络药理学对药物治疗疾病的靶点、通路等可以

醇、柚皮素、圣草酚、芫花素、木犀草素、

L

-薄荷酮、

L

-薄

荷醇、胡椒酮。现阶段发现金合欢素具备多重生物活

性，如抑菌、抗炎、抗癌、抗氧化、免疫调节等效用:4]。

蒙花苷可以通过调节炎性因子与炎性介质的水平而产

生抗炎镇痛作用[51。谷留醇的抗炎机制可能是通过

从分子水平上预测，故本文通过该策略研讨胆舒胶囊

医治慢性胆囊炎的分子机制，结果获得12个主要活性

成分，分别为金柑苷、金合欢素、蒙花苷、豆留醇、谷甾

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抑制炎症介质

PGE

2、缓激肽、组胺、5-

HT

等的活性来

抑制游离细胞的迁移[6]。豆留醇和圣草酚具有抗氧

化、抗肿瘤、抗炎症等药理活性。

L

-薄荷酮、

L

-薄荷醇、

胡椒酮为薄荷挥发油中含量高的主要成分，它们可通

过干预消化道钙离子的跨膜运动产生解痉、使消化道

平滑肌松弛，形成利胆作用[7]。周露[8]的研究表明薄

荷挥发油具有显著的抗大肠埃希氏菌、嗜肉菌、白假丝

酵母菌等菌株活性。

药物与疾病的交集靶点36个，包括

VEGFA

、

AKT

1、

EGFR

、

TNF

、

MAPK

3、

PTGS

2、

MMP

9、

MMP

2、

MP

0、

HIF

1

A

等，主要涉及血管生成、炎症反应、癌症进

展、细胞凋亡及氧化应激等生理病理进程。在

VEGFRA

-

VEGFR

2信号蛋白通路中，

PI

3

K

下游信号的

AKT

激活后，通过下游的

Bad

、

mTORCl

、

FOXO

、

GSK

-

3

p

、

eN

0

S

等靶分子调节细胞凋亡和血管通透性、参与

血管生成和浸润转移相关的炎症反应。表皮生长因子

受体（

EGFR

)是影响局部上皮组织新生血管修复和内

皮细胞形成的重要因素，其可以参与癌症、炎症、免疫

疾病的进展^

EGFR

是

EGF

与

TGF

-

ct

受体；同时，相

关研究表明，

EGFR

可导致胆固醇核化过程异常，促使

胆结石的形成[9]。因此，我们推测，薄荷中的有效活

性成分可与

EGFR

相互作用，阻断促炎因子与

EGFR

结合，起到抗炎作用，同时抑制胆结石的形成。肿瘤坏

死因子

（Tumor

necrosis

factor

,

TNF

)是一■类可诱导细

胞凋亡的因子，可由多种细胞分泌表达，其生物学功能

主要包括细胞凋亡、诱导炎症反应和免疫调节等。

TNF

-

a

细胞因子处于家族中最重要的地位，主要通过

对

MAPK

、

NF

-

k

B

、

ERK

等信号通路的上调，起诱导细

胞凋亡和促炎作用[1°]。

MAPK

靶点同样与肿瘤、炎

症、氧化应激密切相关["]，磷酸化的

P

38

MAPK

可激活

许多底物如转录因子、胞浆与胞核内蛋白、蛋白激酶

等，诱导炎症反应、细胞的分化、周期停滞、衰老、凋亡、

细胞因子的产生和

RNA

剪接的调控等，且这种活化作

用通常具有组织细胞特异性。前列腺素内过氧化物合

酶（

PTGS

2)作为环氧酶途径中的双功能酶，作为前列

腺素中氧化酶的还原酶，具备

C

0

X

与过氧化酶活性，

可将花生四烯酸催化成前列腺素，推测薄荷活性成分

可能通过抑制

PTGS

2以达到抗炎、镇痛效果

。MMPs

是肽链内切酶，它能够降解细胞外基（

ECM

)的组成成

分，

MMP

9、

MMP

2可促成肿瘤新生血管的形成，导致血

管局部基底膜降解，创造促进血管生成，促进肿瘤细胞

侵袭转移的微环境[12]。髓系细胞中的髓过氧化物酶

(

MP

0)遇到病原体后，骨髓细胞可以产生过量的

H

202，

MP

0与

H

202等氧化剂发生过氧化反应和正卤

化反应，产生杀菌能力很强的次氯酸（

HC

10),可引起

蛋白质破裂、

DNA

变性和氨基酸分解等病理过程"3、

缺氧诱导因子

l

(

HIF

-

l

)作为一种由机体在缺氧时产

生的依赖氧的转录激活物，诱导

VEGF

、促炎黏附分子

和趋化因子的表达，调节机体适应缺氧环境。

经过

GO

及

KEGG

富集结果分析可知，

GO

富集分

析发现关键靶点参与细胞的氧化应激反应、金属离子

的响应、正向调节平滑肌细胞的增殖、胶原代谢过程等

生物进程；蛋白磷酸酶、丝氨酸水解酶活性、过氧化酶

活性等分子功能；膜筏、膜微结构域、肥大细胞颗粒等

细胞成分。

KEGG

富集分析提示胆舒胶囊主要是通过

癌症、

TNF

、

Relaxin

、磷酸酯酶

D

、

VEGF

、

HIF

-1等信号

通路发挥协同作用。

HIF

-1通路水平的变化与

AKT

,

NF

-

k

B

通路有关，还可诱导

VEGF

的转录，为干预炎症

损伤、氧化应激、凋亡、肿瘤的重要信号通路[14]。薄荷

活性成分可通过

Relaxin

信号通路发挥抗炎作用：

relaxin

-2可以抑制

TNF

-

a

诱导的单核细胞对血管内皮

细胞的粘附[15]。

综上所述，本文初次运用网络药理学的策略研究

胆舒胶囊医治慢性胆囊炎分子机制，提示其可能通过

抗炎镇痛、解痉、利胆、抗菌等方面来治疗慢性胆囊炎；

成功地预测了胆舒胶囊治疗慢性胆囊炎主要作用的靶

点与相关的信号通路，发现胆舒胶囊经过多组分-多

靶点-多通路发挥医治作用，为后续的实验研究等提

供参考。

参考文献

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能的影响[1].光明中医，2020,35(4):476479.

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WH

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CHANG

ST

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of

antibacterial

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-

a

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[11]

PLOTNIKOV

A

,

ZEH

0

RAI

E,PROCACCIA

S

.

The

MAPK

cascades

：

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[14]

TALKS

KL,TRURLEY

H,GATTER

KC,et

al

.

The

expression

and

Signaling

components

,

nuclear

roles

and

mechanisms

of

nuclear

translocation

[

J

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Biochim

Biophys

Acta

,2011,1813(9) ：1619-1633.

[12 ]

FANG

CY

,

WU

CZ

,

CHEN

PN

,

et

al

.

Antimetastatic

potentials

of

distdbution

of

the

hypoxia-inducible

factors

HIF

-1

alpha

and

HIF

-

2

alpha

in

normal

human

tissues

,

cancers

,

and

tumor

associated

salvianolic

acid

A

on

oral

squamous

cell

carcinoma

by

targeting

MMP

-2

and

the

c

-

Raf

/

MEK/ERK

pathway

[

J

].

Environ

Toxicol

,

2018, 33(5) ： 545-554.

[13]

VAMHAME

L,ZOUAOUI

BOUDJELTIA

K,VAN

ANTWERPEN

P

,

macro

-

phages

[

J

].

Am

J

pathol

,2000,157(2) ：411 -421.

[15]

BRECHT

A

,

BARTSCH

C

,

BAUMANN

G

,

et

al

.

Relaxin

inhibits

early

steps

in

vascular

inflammation

[

J

].

Regul

Pept

, 2011, 166(1-

3) ： 76-82.

et

al

.

The

other

myeloperoxidsase

：

Emerging

functions

[

J

]

.

Arch

Biochem

Biophys

,2018 ,649 ： 1-14.

(本文校对：陈小英收稿日期：2020 - 11 -05)

健脾和胃汤对慢性胃炎患者胃肠功能及

免疫功能的影响

宋永玲

摘要：目的观察健脾和胃汤对慢性胃炎患者疗效，分析其对患者胃肠功能及免疫功能的影响。方法选择2018年1月一

2019年6月接受诊治的100例

HP

阳性慢性胃炎患者，使用随机数字表法分为对照组（50例）和观察组（50例）。对照组采用“四

联”疗法，即奥美拉唑片、阿莫西林肢囊、克拉霉素片和枸橼酸铋钾肢囊；观察组加用健脾和胃汤。2组均连续治疗14

d

。记录治疗

前后2组患者胃肠道症状评定量表（

GSRS

)评分、胃肠道症状积分问卷（

GIS

)评分，检测治疗前后患者血清

CD

3+、

CD

4+、

CD

8+的

指标。结果治疗后观察组

GSRS

评分、

GIS

积分低于对照组（

P

<0.05);治疗后观察组血清

CD

3+、

CD

4+、

CD

8 +水平高于对照组，

IgA

、

IgG

水平低于对照组

（P

<0.05);观察组临床疗效高于对照组（/><0.05)。结论健脾和胃汤可以有效治疗慢性胃炎，对慢性

胃炎患者的胃肠功能和免疫功能有着明显的改善作用。

关键词：胃脘痛；慢性胃炎；健脾和胃汤；中医药疗法

doi: 10. 3969/j.

issn

.

1003 -8914. 2021.06.007

文章编号

：1003 -8914 (2021) 46-0868 -03

慢性胃炎是指胃黏膜发生慢性炎性病变，常发

于急性胃炎后，最常见的病因是

Hp

感染，烟酒、药

物、饮食不规律也能引发慢性胃炎。现代人生活节

奏不断加快，慢性胃炎的发病率逐年增高〜。传统

临床治疗慢性胃炎采用“四联”疗法，即一种抑酸药

物加2种抗生素加一种胃黏膜保护剂。“四联”疗法

具有极强的杀菌作用，能根治幽门螺杆菌

（Hp

)感

染，但“四联”疗法会刺激胃肠道黏膜，引起呕吐、腹

泻等严重的胃肠道不良反应，且服用大量抗生素，会

造成内分泌失调，影响机体的免疫功能，因此“四联”

疗法需要联合其他药物使用降低毒副作用[2]。健脾

和胃汤具有疏肝解郁、健脾和胃的作用，经临床观察

健脾和胃汤在慢性胃炎的治疗上有着良好的疗效，

且药性温和，不良作用小[3]。本次研究将联合使用

健脾和胃汤和“四联”药物治疗慢性胃炎患者，观察

健脾和胃汤治疗慢性胃炎的疗效，和对患者胃肠功

能及免疫功能的影响。

1资料与方法

1.1 —般资料选择2018年1月一2019年6月在医

院接受诊治的

Hp

阳性慢性胃炎患者100例，用随机

数字表法分成观察组50例和对照组50例。对照组中

男性患者25例，女性患者25例；平均年龄（39.55 ±

8. 29)岁；病程1 ~ 10个月，平均病程（6. 72 ±2. 18)个

月。观察组中男性患者24例，女性患者26例；平均年

龄（ 39.20 ± 8.04)岁；病程1 ~ 10个月，平均病程

(6. 34 ±2. 34)个月。2组患者性别、年龄、病程等一般

资料比较，差异无统计学意义

（P

>〇.〇5),具有可

比性。

1.2诊断标准西医诊断标准参照《中国慢性胃炎

共识意见（2017年，上海）》[4]:①临床上出现上腹痛、

消化不良等症状。②内镜检查显示胃黏膜红斑、出血

或红白相间、皱襞变平，以及胃黏膜糜烂，胆汁反流等

现象。③血清抗体检测显示

HP

阳性。中医诊断标准

参照《慢性胃炎中西医结合诊疗共识意见（2011年天

作者单位：安阳市第=人民医院消化内科（河南安阳455000)

通讯方式：

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526344@ 163.

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津）》[5]:①临床上出现上腹灼热胀痛等症状。②舌