2024年4月16日发(作者：)

弥漫性大B细胞淋巴瘤免疫表型分析

韩永胜;杨海燕

【摘 要】目的:探讨CD10、bcl-6、MUM1和bcl-2蛋白在弥漫性大B细胞淋巴

瘤(DLBCL)中的参达及其预后意义.方法:应用免疫组织化学SP法检测59例DLBCL

中CD10、bcl-6、MUM1和bel-2的表达,采用Hans免疫分型方法将DLBCL分

为生发中心B细胞(GCB)型和非GCB型,分析免疫表型与预后的关系.结果:在59例

DLBCL中,CD10、bel-6、MUM1和bcl-2蛋白的表达率分别是20.3%(12/59)、

37.3%(22/59)、50.8%(30/59)和 67.8(40/59)%.Hans分型:28.8%(17/59)为

GCB型,71.2%(42/59)为非GCB型.bcl-6表达阳性和GCB亚型患者总生存(OS)率

高于bcl-6表达阴性和非GCB亚型患者(P值分别为0.030和0.047),而CD10、

MUM1和bcl-2表达对OS率均无明显影响(p值分别为0.057、0.992和0.419).

结论:bcl-6表达和免疫分型与DLBCL患者的预后有关,可成为DLBCL个体化治疗

的重要依据.

【期刊名称】《安徽卫生职业技术学院学报》

【年(卷),期】2012(011)004

【总页数】3页(P83-84,97)

【关键词】弥漫性大B细胞淋巴瘤;免疫表型;预后

【作 者】韩永胜;杨海燕

【作者单位】安徽医科大学附属省立医院,合肥,230001;浙江省肿瘤医院,杭

州,310022

【正文语种】中 文

【中图分类】R392.12

弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是淋巴瘤的最常见类型，是一组在临床、免疫

表型、遗传学特征及预后等方面具有很大异质性的恶性肿瘤。近年来，DLBCL的

治疗取得了较大进展，但是仍有超过30%的患者无法被治愈。本文应用免疫组化

方法检测了 59例 DLBCL中 CD10、bcl-6、MUM1和 bcl-2的表达，并探讨了

免疫表型与预后的关系，旨在为DLBCL的预后评估和合理治疗提供理论依据。

1.1 一般资料 收集2002～2008年间就诊于浙江省肿瘤医院的原发DLBCL 59例。

由该院病理科再次给出病理诊断，诊断标准依据WHO造血与淋巴组织肿瘤分类

标准。同时收集相关的临床和随访资料。

1.2 免疫组化检测及结果判定 一抗CD10(56C6)、bcl-6(LN22)、

MUM1(MUM1P)、bcl-2(100/D5)及免 疫组化超敏SP试剂盒购自福州迈新生物

技术开发有限公司。石蜡包埋组织4μm 切片，经脱蜡、水化后，EDTA修复液进

行水煮加热(CD10、bcl-6、MUM1)或柠檬酸盐缓冲液进行高压加热(bcl-2)抗原

修复，用3步SP法染色，DAB显色，苏木素复染，脱水，二甲苯透明，中性树

胶封固，显微镜观察。用已知阳性的淋巴瘤组织切片作为阳性对照，PBS代替一

抗作为阴性对照。CD10和bcl-2表达于细胞膜或细胞浆，bcl-6和MUM1表达

于细胞核。阳性病例判断标准参照文献[1]，均以30%以上的肿瘤细胞出现定位清

晰的颗粒状淡黄色至棕黄色着色判断为阳性。

1.3 免疫表型分型 采用Hans等[1]的分型方法，根据CD10、bcl-6和MUM1的

表达将DLBCL分为生发中心B细胞（GCB）亚型和非GCB亚型：CD10(＋)/bcl-

6(＋/－)/MUM1(＋/－)归入 GCB亚型，CD10(－)/bcl-6(＋)/MUM1(－)也归入

GCB亚型，其余均归入非GCB亚型。

1.4 统计学处理 应用SPSS 13.0软件进行统计学分析，总生存（OS）率的计算采

用Kaplan-Meier法，单因素生存分析采用Log-rank检验。

2.1 临床情况 59例DLBCL患者中位年龄55（14～85）岁，男37例，女22例，

男女比例1.68∶1。原发部位在结内者36例，结外者23例。共有51例获得随访

资料，这部分病例主要治疗包括单纯化疗(26例)、手术＋化疗(20例)、手术＋化

疗＋放疗(3例)和化疗＋放疗(2例)，其中45例化疗为CHOP方案（环磷酰胺＋

阿霉素＋长春新碱＋泼尼松），6例为CHOP方案及R(利妥昔单抗)-CHOP方案，

疗程2～10个不等。中位随访时间16(2～69)个月，2年OS率(57.4±7.8)%。

2.2 免疫表型及其与预后的关系 免疫组化检测及免疫表型分型结果见表1。采用

Log-rank检验进行单因素预后分析显示，bcl-6表达和免疫分型均与OS率有关

(P值分别为0.030和0.047)，而CD10、MUM1和bcl-2表达对OS率均无明显

影响 (P值分别为 0.057、0.992和 0.419)，见表 1。

CD10是一种膜相关中性肽链内切酶，正常表达于GCB细胞，因而可作为生发中

心标志物。约25%～40%的DLBCL表达CD10，CD10表达与B细胞肿瘤凋亡之

间存在正相关关系，但CD10表达的预后意义存有争议[1～3]。CD10在本组

DLBCL中的阳性率为20.3%，稍低于文献报道，CD10阳性患者OS率明显高于

阴性患者，但差异无统计学意义，提示CD10表达不能作为DLBCL的预后指标。

bcl-6蛋白是一种具有锌指结构的转录抑制因子，正常表达于GCB细胞及小部分

CD4+T细胞。约60%的DLBCL表达bcl-6，bcl-6的异常表达与DLBCL的发生

相关，但其预后意义也有争议[1～3]。本组患者中bcl-6表达阳性率为37.3%，低

于国外文献报道，但与国内Chen等[4]报道的36%相近，这可能与亚洲国家GCB

亚型的DLBCL较少见有关。在本组DLBCL中，bcl-6表达阳性患者的OS率明显

高于阴性患者，差异有统计学意义，表明bcl-6表达是DLBCL患者预后较好的标

志。在DLBCL中bcl-6能抑制NF-kB活性，从而抑制NF-kB抗凋亡作用[5]，这

可能与bcl-6表达阳性患者预后较好有关。

MUM1同样是一种转录因子，正常表达于浆细胞，并与bcl-6表达相互排斥。

50%～60%DLBCL患者表达MUM1,其预后意义同样不明确[1～3]。本研究中

MUM1表达阳性率为50.8%，与文献报道相符。MUM1表达阳性患者与阴性患

者预后无明显差异，提示MUM1表达不能作为预测DLBCL患者预后情况的指标。

2004年Hans等[1]发现应用免疫组化技术检测CD10、bcl-6和MUM1的表达

模式能将DLBCL分为预后不同的两型，即GCB型和非GCB型，此后该分型方法

被广泛采用。多数研究表明在CHOP方案治疗的患者中，GCB型DLBCL比非

GCB型DLBCL预后好[1～2]。但在R-CHOP方案治疗的患者中，免疫分型对预

后判断存有争议[6～7]。在本组59例DLBCL患者中，17例（28.8%）为GCB亚

型，低于西方国家的约50%[2～3,6]，但与亚洲国家的报道相符[4]。本研究可评

估预后的51例患者，均接受CHOP方案化疗，其中6例联用利妥昔单抗。生存

分析表明GCB型DLBCL的OS明显高于非GCB型DLBCL,差异具有统计学意义，

提示免疫分型与DLBCL患者的预后有关，可成为今后制定DLBCL个体化治疗方

案的重要依据。

bcl-2蛋白是一种对正常B细胞发育及分化起重要作用的抗凋亡蛋白，在B细胞发

育的生发中心期受抑，与bcl-6表达负相关。50%～70%DLBCL表达bcl-2蛋白

[1～2]，它通过抗凋亡作用而赋予细胞生存优势并介导对常规化疗的抗性。大部分

文献报告bcl-2表达阳性患者预后较差，少数报告bcl-2表达对预后无明显影响。

在化疗联用利妥昔单抗的临床中未发现bcl-2表达与预后之间的相关性[6]，提示

利妥昔单抗能克服bcl-2表达对预后的不利影响。研究表明利妥昔单抗能抑制NF-

kB途径，另外还能下调IL-10，减少STAT3磷酸化，从而使bcl-2表达下降[6]。

本组病例bcl-2表达阳性率为67.8%，与文献报道相符。但本研究中bcl-2表达对

预后无明显影响，与多数文献报告不一致。其原因可能：①DLBCL高度异质性，

小样本研究导致病例选择偏倚；②部分病例联用了利妥昔单抗。因此，对于bcl-2

表达的预后意义，尚需大宗病例的进一步研究。

Key Words:Diffuse Large B-cell Lymphoma;Immunophenotypic

Analysis;prognosis

【相关文献】

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Abstracts:Objective:To investigate the expression of CD10、bcl-6、MUM1 and bcl-2

protein in diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL)and their prognostic

s:Immunohistochemical SPmethod was used to detect the

expression of CD10,bcl-6,MUM1 and bcl-2 in 59 cases of Hans algorithm was

applied to classify DLBCL into germinal center B-cell(GCB)and non-GCB

correlation of prognosis with immunophenotype was :Of the 59 DLBCL

cases,expression of CD10 was observed in 12 cases(20.3%),bcl-6 in 22(37.3%),MUM1 in

30(50.8%),and bcl-2 in 40(67.8%).According to Hans algorithm,17 cases(28.8%)belonged

GCB subtype and 42 cases(71.2%)belonged to non-GCB overall

survival(OS)rates of bcl-6-positive and GCB subtype patientswere higher than that of bcl-

6-negative and non-GCB subtype patients(P=0.030 and 0.047,respectively).The expression

of CD1O、MUM1 and bcl-2 did not exert significant effect on OS rate(P=0.057,0.992 and

0.419,respectively).Conclusion:bcl-6 expression and immunophenotyping are associated

with the prognosis of DLBCL patients and might become important bases for tailored

therapy of DLBCL.