2024年4月13日发(作者：)

CTAB法提取植物基因组DNA

CTAB法原理

CTAB（

Cetyl trimethyl ammonium bromide

），十六烷基三甲基溴化铵，是一种阳离子去污

剂，可溶解细胞膜，能与核酸形成复合物，具有从低离子强度溶液中沉淀核酸的特性。

当降低溶液盐浓度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）时，CTAB-核酸的复合物从溶液中沉淀，通过

离心就可将其与蛋白，多糖类物质分开，在经过有机溶剂抽提，去除蛋白，多糖，酚类等杂质。最后

通过乙醇或异丙醇沉淀DNA，而CTAB溶于乙醇或异丙醇而除去

在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl)， CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，不能沉淀核酸。

CTAB溶液在低于15℃时会形成沉淀析出，因此，在将其加入冰冷的植物材料之前必须预热，且离心

时温度不要低于15℃。另外，它还能保护DNA不受内源核酸酶的降解。

主要试剂与溶液的配制：

PVP（聚乙烯吡咯烷酮K30）

巯基乙醇

氯仿︰异戊醇（24︰1）

异丙醇

70%乙醇

Tris-苯酚

RNaseA

无水乙醇

CTAB 溶液：CTAB——20g/L

NaCl（58.44）——1.4 mol/L（81.816g）

EDTA（292.25）——10 mmol/L（2.9225g）

Tris（121.14）——100 mmol/L（12.114g）

pH 8.0

1×TE 缓冲液：EDTA（292.25）——1 mmol/L（0.29225g）

Tris（121.14）——10 mmol/L（1.2114g）

pH 8.0

NaAC溶液：NaAC（82.03）——3mol/L（246.09g）

pH 4.0

植物总DNA的提取