2024年3月12日发(作者：)

· 898 ·

doi:10.3969/.1000-3606.2019.12.005

临床儿科杂志 第 37 卷第 12 期 2019 年 12 月

J Clin Pediatr Vol.37 No.12 Dec. 2019

CHARGE综合征2例报告并文献复习

杨　莹　刘　毓　文　静　邓婉玲　马春元　邵晓珊

（

贵州贵阳　550003

）

贵阳市妇幼保健院　贵阳市儿童医院内分泌遗传代谢科

摘要：方法　

回顾分析2例确诊因

CHD7

基因变异导致CHARGE　

目的

　探讨CHARGE综合征的临床特征及诊断

。

“

CHARGE综合征

、

CHD7

基因

”

综合征患儿的临床资料

，

并以为关键词

，

检索PubMed

、

HGMD

、

中国知网及万方数据库

结果　

2例男性患儿分别为4月余

、

1998年1月

－

2018年6月收录的文献进行复习

。

8岁2个月

。

均表现为生长发育缓慢

，

伴有听力障碍

、

动脉导管未闭

；

例1伴有视力障碍

，

例2伴睾丸隐匿

。

基因检测例1为

CHD7

基因第29外显子c.5883C>T

（

1945*

）（

p.C989Y

）

杂合无义变异

，

例2为

CHD7

基因第12外显子c.2966G>A杂合变异

。

例1患儿

CHD7

位点突变

导致编码的

CHD7

蛋白截短而致病

；

例2患儿

CHD7

位点变异

，

除本身可能导致的错义突变致病外

，

也可能导致SRp55蛋

（

TGCATT

）

白结合的ESE位点消失

，

影响pre-mRNA剪接的准确率

，

进而影响CHD7蛋白的功能

。

共检索到

CHD7

基因相

结论　

CHARGE综关CHARGE综合征文献107篇

，

涉及到1 021例患者

。

HGMD收录的

CHD7

基因突变数据共计817个

。

CHD7

基因检测有助于诊断

。

合征表现多样

、

涉及多系统

，

关键词：

　CHARGE综合征

；

　

CHD7

基因

；

　临床特点

；

　外显子剪接增强子

CHARGE syndrome: report of 2 cases and literature review

　

YANG Ying, LIU Yu, WEN Jing, DENG Wanling, MA

Chunyuan, SHAO Xiaoshan (Department of Hereditary Endocrinology and Metabolism, Maternal and Child Health-Care

Hospital in Guiyang, Guiyang 550003, Guizhou, China)

Abstract:

　

Objective

　

To explore the clinical characteristics and diagnosis of CHARGE syndrome. Methods

　

The clinical

data of CHARGE syndrome due to CHD7 gene mutation in two children were analyzed retrospectively. The databases of PubMed,

HGMD, CNKI, and WanFang were searched from January 1998 to June 2018 with the key words of "CHARGE syndrome and CHD7

gene" and the literatures were reviewed. Results

　

Two boys were over 4 months old and 8 years and 2 months old respectively. Both

of them showed slow growth and development retardation, with hearing impairment and patent ductus arteriosus. In addition case 1

had visual impairment and case 2 had occult testis. Genetic analysis showed that the case 1 carried a heterozygous nonsense mutation

of c.5883C>T (1945*) in the 29th exon of CHD7 gene, and case 2 carried a heterozygous mutation of c.2966G>A (p.C989Y)

in the 12nd exon of CHD7 gene. In case 1, CHD7 mutation led to the truncation of the encoded CHD7 protein, which caused the

disease. In case 2, the CHD7 mutation may not only cause missense mutation itself, but may also cause the disappearance of the ESE

(TGCATT) site bound by SRp55 protein, affecting the accuracy of pre-mRNA splicing, and thereby affecting the function of CHD7

protein. A total of 107 articles on CHD7 gene causing CHARGE syndrome were retrieved and covered 1021 patients. There were 817

mutations data of CHD7 gene collected in HGMD. Conclusions

　

The symptoms of CHARGE syndrome are diverse and involve

multiple systems. The CHD7 gene detection is helpful for the diagnosis of CHARGE syndrome.

Key words:

　

CHARGE syndrome;

　

CHD7 gene;

　

clinical feature;

　

exon splicing enhancer

（

OMIM 214800

）

CHARGE综合征是一种多发性

畸形综合征

，

其特征主要包括眼部缺损

、

后鼻孔闭锁

、

颅神经缺损

、

独特的内耳或外耳畸形

、

听力丧失

、

心血

近年来

管畸形

、

泌尿生殖系统异常或生长迟缓

[1-3]

。

报道的

CHD7

基因突变是导致CHARGE综合征的主

要原因

。

目前中国鲜有CHARGE综合征报道

。

本文对

通信作者：邵晓珊　电子信箱：58367670@

2017

－

2018年收治的2例CHARGE综合征患儿的临

床表现及其诊断经过进行总结

，

并复习相关文献

。

1　临床资料

例1

，

男

，

4月余

，

因生长发育缓慢2个月就诊于

贵阳市妇幼保健院小儿内分泌遗传代谢门诊

。

患儿为

临床儿科杂志 第 37 卷第 12 期 2019 年 12 月

J Clin Pediatr Vol.37 No.12 Dec. 2019

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G3P1

，

出生体质量2.2 kg

，

身长48 cm

，

足月剖宫产

，

无产伤及窒息史

。

新生儿听力及视力筛查异常

。

母亲

既往有过2次不明原因流产史

。

父母及同父异母姐姐

体健

。

体格检查

：

身高53 cm

（

<

P

3

），

体质量5.0 kg

（

<

P

3

），

头颅五官基本对称

，

双眼角下塌

，

不会追物

，

耳廓呈

圆弧形

、

多毛

，

耳位低

。

胸廓畸形

，

呈漏斗状

，

肺部可

闻及喉传导音

，

心前区可闻及II/VI级收缩期吹风样

杂音

，

无明显传导

。

六指畸形

。

阴茎外露细小

，

长约

1.5 cm

，

直径约1 cm

，

左侧阴囊可扪及睾丸约1 mL

，

右侧阴囊空虚

，

未扪及睾丸

，

右腹股沟区可扪及睾丸

样物0.5 cm

×

0.3 cm

×

0.3 cm

。

串联质谱检查无异常

。

心脏B超示动脉导管未闭

，

继发孔型小房缺

。

头颅磁

共振成像

（

MRI

）

示双侧苍白球对称性短T1信号

。

例2

，

男

，

8岁2个月

，

因生长发育缓慢7年就诊于

贵阳市妇幼保健院小儿内分泌遗传代谢门诊

。

就诊前

7年家长发现患儿身高

、

体质量明显落后于同龄儿

，

且

发声低

，

语言发育落后

。

因先天性耳聋安装助听器

，

现可简单语言交流

。

5年前发现睾丸隐匿

，

外科行睾丸

下降固定术

。

出生时曾被诊断动脉导管未闭

，

18个月

复查已自愈

。

患儿为G2P2

，

足月剖宫产

，

无产伤及窒

息史

。

父母体健

。

体格检查

：

身高120.2 cm

（

P

3

~

P

15

），

体质量22.5 kg

（

P

3

~

P

15

）。

五官基本对称

，

耳小呈圆形

，

耳位低

。

肺部可闻及喉传导音

。

阴茎外露细小

，

长约

2 cm

，

直径约1 cm

，

双侧睾丸可扪及约1 mL

，

提睾反

射存在

。

辅助检查

：

头颅MRI示双侧脑室稍丰满

，

第

六脑室显示

。

染色体检查为46

，

XY

。

睾酮0.01

μ

g/L

。

经医院医学伦理审核及监护人知情同意

，

取患儿

及父母外周血

，

由第三方检验完成基因测序

。

采用二

代高通量测序

，

并经Sanger验证

。

结果发现

，

例1患

儿

CHD7

（

NM_017780

）

基因第29外显子c.5883C>T

1945*

）

为杂合无义变异

，

其父母均未发生变异

图1

），

根据ACMG指南的致病性分析该变异为强致

病等级

；

例2患儿

CHD7

（

NM_017780

）

基因第12外显

子c.2966G>A

（

p.C989Y

）

杂合变异

，

其父母均未发生

变异

（

图2

），

根据ACMG指南的致病性分析该变异为

疑似致病性变异

。

2　讨论

以

“

CHARGE syndrome

、

CHD7

”

为关键词

，

检索

PubMed数据库1981

－

2018年6月的相关文献

。

共检

出130篇文献

，

其中综述11篇

，

耳聋/植入耳蜗相关文

献21篇

，

CHD7

基因相关CHARGE综合征98篇

，

涉及

到1 021例患者

。

HGMD收录的

CHD7

基因突变数据

共计817个

，

其中与CHARGE综合征的相关位点711

图1　例1患儿家系

CHD7

基因检测结果

图2　例2患儿家系

CHD7

基因检测结果

个

，

致病位点683个

。

突变位点中无义突变196个

，

移

码突变317个

，

错义突变81个

，

剪切突变89个

；

涉及

CHD7

基因大片段缺失突变15个

，

大片段插入1个

；

染色体易位2个

，

微缺失/微插入10个

。

中国知网

、

万

方数据库共收录文献9篇

。

CHD7是哺乳动物细胞中ATP依赖性染色质域

解旋酶DNA结合蛋白家族的九个成员之一

。

2010年

研究者在对非洲爪蟾胚胎的

CHD7

基因敲除实验中

，

发现了CHARGE综合征的所有特征

，

证明CHD7在

人类和非洲爪蟾中对起源于外胚层发育的神经嵴形

成的广泛分化潜能与在全身迁移能力的功能至关重

要

[4]

。

在小鼠实验中也发现CHD7可作为转录因子与

P53启动子结合起调控作用

，

进而影响小鼠的发育

[5]

。

CHARGE综合征的主要致病基因为

CHD7

（

OMIM

608892

），

为常染色体显性遗传的致病基因

，

其位于

8q12

，

全长188 kbp

，

由38个外显子组成

（

图3A

），

编

码2 997个氨基酸

，

包含6个结构域

（

图3B

），

分别为

Med15结构域

（

控制多细胞动物早期发育关键的基因

激活信号转导子

）、

2个CH结构域

（

约50个保守氨基

酸的染色质结构修饰结构域

，

主要在真核细胞核的功

能组织中起作用

，

与蛋白中的组氨酸或RNA的甲基

化调控相关

）、

SNF2家族N端结构域

（

涉及转录调节

、

DNA修复

、

DNA重组和染色质解旋功能

），

以及2个

BRK结构域

（

通常与解旋酶和转录因子相关

）。

例1患儿的突变位点c.5883C>T位于第29外

显子

，

该突变导致其编码的精氨酸变为终止密码

子

（

1945*

），

致使CHD7蛋白变为截断蛋白

。

（

（

· 900 ·

临床儿科杂志 第 37 卷第 12 期 2019 年 12 月

J Clin Pediatr Vol.37 No.12 Dec. 2019

CHD7

A.

CHD7

基因的外显子模式，红色箭头所示分别为本文2例患

儿

CHD7

基因变异位置；7蛋白包含的结构域，红色箭

头为本文2例患儿氨基酸突变位置；C.不同种属间CHD7蛋

白序列保守性分析，红色箭头处为本文2例患儿突变位点

图3　

CHD7

的结构域及突变位点保守性分析

对其氨基酸位点分析发现

，

在不同物种中

，

如

Mus

（

NP_001264078.1

）、（

XP_697956.4

）、

DanionSus

（

XP_020944994.1

）、（

XP_024857592.1

）、

BosCanis

（

XP_544097.2

）（

图3C

）。

属保守性位点该突变位点

已有报道

，

曾在110例CHARGE综合征患者中检测到

本例患儿临床有动脉导管未闭

、

继

1例c.5833C>T

[6]

。

发孔型小房缺

、

耳异常

、

六指畸形

、

生殖器异常

，

符合

[3]

（

表1

）

。

CHARGE综合征的诊断标准

CHD7

CHD7

例2患儿中的突变位点c.2966G>A位于第12外

显子的第9位

，

该突变导致

CHD7

基因的989位的半

胱氨酸突变为酪氨酸

。

本例患儿在临床上表现有动

脉导管未闭

、

外耳异常

、

生殖器异常

、

听力障碍及发

育迟缓

，

也符合CHARGE综合征的诊断标准

。

目前

在HGMD数据库中发现

CHD7

基因在第12外显子的

c.2966附近位置收录了c.2966delG导致的移码突变

p.C989Sfs*3

，

c.2959C>T导致的无意义突变R987X

以及c.2958-1G>A

、

c.2958-2A>T导致的剪接变异

[7-10]

A. reference sequence是

CHD7

野生型即c.2966G（绿色标

注），mutant sequence 是

CHD7

变异型即c.2966G>A（红

色标注）；B. 在ESE finder网站中预测结果，左图为

CHD7

c.2966G野生型，右图为

CHD7

c.2966G>A

图4　

CHD7

c.2966G>A突变分析

（

TGCATT

）（

图4A

），

splice enhancer

）

区域对突变序列

预测后发现SRp55结合位点被完全破坏

。

同时经ESE

finder网站预测发现

，

c.2966G>A突变型SRp55结合

（

图4B

）。（

pre-mRNA

）

位点消失前体mRNA进行精

准剪切然后连接在一起

，

形成正确的成熟mRNA是

基因行使功能的关键

。

pre-mRNA选择性剪接机制包

括RNA自身调控位点与蛋白相互作用

、

RNA-RNA碱

基配对相互作用等

。

引起疾病的突变通常发生在内含

子边界附近的剪接位点或突变导致调节RNA剪接的

（

外显子或内含子中

）

沉默子或增强子元件发生破坏

，

从而造成pre-mRNA的错误性剪接导致编码的蛋白异

常

。

而ESE调控的pre-mRNA剪接机制属于RNA-蛋

白互作中的调控范围

。

ESEs能够被特异性富含丝氨

（

SR蛋白

，

酸/精氨酸蛋白serine/arginine-rich proteins

）

。（

p.C989Y

）

由于

CHD7

基因 c.2966G>A变异

位点在HGMD中未收录

，

因此对该氨基酸位点在不

（

图同种属中进行保守性分析

，

结果发现其非常保守

。（

/3C

）

通过Human Splicing Finder

（

NM_017780

）

HSF3/

）

对本例患儿

CHD7

突

变位点c.2966G>A进行预测分析发现

，

该变异位点位

（

ESE

，

于SRp55蛋白结合的外显子剪接增强子exonic

表1　CHARGE综合征临床诊断标准（2016）

　　主要特征

1.先天性缺损

2.后鼻孔闭锁或腭裂

3.外耳、中耳或内耳异常，包括半规管发育不全

4.致病性

CHD7

基因突变

　　次要特征

1.颅神经麻痹或脑干功能障碍包括听力障碍

2.吞咽困难/喂养困难

3.脑结构异常

4.发育迟缓/智力障碍/自闭症

5.下丘脑垂体功能障碍（促性腺激素或生长激素缺乏）和生殖器异常

6.器官（心脏和/或食管）畸形

7.肾异常，骨骼/肢体异常

CHARGE综合征诊断：两个主要特征+次要特征（无或多个）

临床儿科杂志 第 37 卷第 12 期 2019 年 12 月

J Clin Pediatr Vol.37 No.12 Dec. 2019

· 901 ·

识别和结合

，

这是一个结构相关及高度保守的剪接因

例2

子SR家族

。

SRp55是SR家族中的成员之一

[11]

。

患者

CHD7

c.2966G>A变异位置位于SRp55蛋白识

别的外显子剪接增强子上

，

如图4B所示

，

该变异导致

第12外显子临近剪切位点的ESE破坏

，

有可能影响

CHD7

转录的pre-mRNA剪接成成熟的mRNA准确率

，

进而表达的蛋白功能产生异常

。

综上所述

，

CHARGE综合征临床表现多样

，

涉及

多系统

。

CHARGE综合征可由

CHD7

及

SEMA3E

基因

变异导致

，

其中

CHD7

基因突变是导致

CHARGE

综合

征的主要原因

。

本组例1患儿

CHD7

位点突变导致编

码的

CHD7

蛋白截短

；

例2患儿

CHD7

位点变异除本

身可能导致错义突变致病外

，

也可能由于变异位点导

（

TGCATT

）

致SRp55蛋白结合的ESE位点消失

，

影响

pre-mRNA剪接准确率

，

进而影响CHD7蛋白功能

。

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[11] Lee Y, Rio DC. Mechanisms and regulation of alternative pre-

mRNA splicing [J]. Annu Rev Biochem, 2015, 84: 291-323.

(收稿日期：2019-04-26)

蔡虹蔚

)(本文编辑：

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