2024年4月13日发(作者：)

CTAB配方及植物DNA提取方法

主要试剂的配制

参考（美）萨姆布鲁克（sambrook，j.）等.分子克隆实验指南（下册）配置如下

[94]：

（1）0.5mo1/ledta(ph8.0)：称取edta-na218.61g，提80ml双蒸水，磁力搅拌器

上频繁烘烤。重新加入7ml10mo1/lnaoh调到ph8.0再用双蒸水定容至100ml，在

1.03×105pa之下高压杀菌20min。

（2）5mol/lnacl溶液：称取nacl29.22g，溶解于90ml的双蒸水，加热到80℃溶

解，冷却，再用双蒸水定容100ml，在高压灭菌20min。

（3）10mol/lnaoh溶液：称取40.00gnaoh溶80ml的双蒸水，烘烤，定容至

100ml。（4）1mol/ltris-hc1溶液(ph8.0)：称取12.114gtris碱，溶80ml的双蒸水，

重新加入浓hc14.2ml，调整phsuperficial8.0，搅拌定容至100ml，高压杀菌20min。

（5）10%ctab（m/v）：称取ctab10.00g，熔化于80ml的双蒸水，冷却推动熔化，提

双蒸水定容至100ml，室温留存。

（6）5mo1/lkac溶液(ph4.8和6.5)：分别称取kac晶体49.07g，溶于80ml的双

蒸水，再用冰乙酸调至ph4.8和6.5，加双蒸水定容到100ml，在1.03×

105pa之下杀菌20min。4℃留存。（7）3mo1/lnaac3h2o溶液(ph5.2)：称取

naac晶体20.412g熔化于约30ml的双蒸水，用冰乙酸调到ph5.2，提双蒸水定容至

50ml，高压杀菌20min。4℃留存。

（8）提取缓冲液（0.4mol/l葡萄糖，3%pvp，2％β-巯基乙醇）250ml：称取葡萄

糖19.817g、pvp7.50g，加水溶解并定容到250ml，在1.03×105pa下灭菌20min，

β-巯基乙醇现用现加。4℃保存。

（9）水解缓冲液（3%ctab；100mmo1/ltris-hc1，ph8.0；20mmo1/ledta，

ph8.0；1.4mol/lnacl；2％β-巯基乙醇）100ml：挑10%ctab30ml，提1mol/ltris～

hc1(ph8.0)10ml，提0.5mo1/ledta(ph8.0)4ml，提5mol/lnacl28ml并定容到100ml，

高压杀菌20min，β-巯基乙醇现用现加。

（11）te缓冲液(10mmo1/ltris-hc1，ph8.0；1mmo1/ledta，ph8.0)：取tris-hcl

溶液(ph8.0)1ml，edta(ph8.0)0.2ml，用双蒸水定容到100ml，高压灭菌20min。4℃

保存。

（12）电泳缓冲液tae（tris-乙酸）的酿制

50×tae母液的配制：242.0gtris-bace、57.1ml冰乙酸、

100ml0.5mo1/ledta(ph8.0)，用双蒸水空容至1000ml。

1×tae电泳缓冲液的酿制：挑50×tae10ml，再重新加入490ml双蒸水，定容至

500ml