2023年12月13日发(作者：)

ｌ３２　广东农业科学２０１２年第１期　革胡子鲶、本地胡子鲶及其杂交种血清　转铁蛋白的遗传多态性　夏敏　，牟希东　，罗　渡　，胡隐昌’，宋红梅　，杨叶欣　，罗建仁　２．上海海洋大学水产与生命学院，上海２０１３０６）　摘要：用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了革胡子鲶（Ｃｌｒｉａｍ　ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ）、本地胡子鲶（Ｃｌａｒｉｓ知ＣＵＳ　Ｌａｃｅｐｅｄｅ）及其杂交个体Ｆ　的　血清转铁蛋白（Ｔｆ）的多态性。结果表明，３种鲶鱼均出现２个Ｔｆ区域，即Ｔｆ一区和Ｔｆ二区，革胡子鲶在一区的表达量最高，且没有　（１．中国水产科学研究院珠江水产研究所，农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室．广东广州５１０３８０　缺失现象；３种胡子鲶受３个等位基因控制，本地胡子鲶出现４种表现型，革胡子鲶与杂交个体只有２种表现型，Ｔｆ杂合体基因型　均大于纯合体基因型；血清铁浓度：革胡子鲶＞杂交个体＞本地胡子鲶．铁饱和度：革胡子鲶＞本地胡子鲶＞杂交个体。说明革胡子鲶　具有更强的耐低氧能力，更能适应恶劣环境。　关键词：血清转铁蛋白；多态性；革胡子鲶；本地胡子鲶；杂交鲶　中图分类号：￥９６５．１２８　文献标识码：Ａ　文章编号：１００４—８７４Ｘ（２０１２）０１—０１３２—０４　Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｃｌａｒｉｓ　ｃａｔｆｉｓｈ　ＸＩＡ　Ｍｉｎ。０　ＭＵ　Ｘｉ—ｄｏｎｇ　，ＬＵＯ　Ｄｕ　，ＨＵ　Ｙｉｎ—ｃｈａｎｇ　，ＳＯＮＧ　Ｈｏｎｇ—ｍｅｉ　，ＹＡＮＧ　Ｙｅ—ｘｉｎ　，ＬＵＯ　Ｊｉａｎ－ｒｅｎ　（１．Ｐｅａｒｌ　Ｒｉｖｅｒ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，ＣＡＦＳ／Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆＴｒｏｐｉｃａｌ＆Ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ　Ｆｉｓｈｅｒｙ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅ　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ＆Ｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５１０３８０，Ｃｈｉｎａ；　２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｉｓｈｅｒ＆ｓ　ａｎｄ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　Ｏｃｅａｎ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈａｎｇｈａｉ　２０１３０６，Ｃｈｉｎａ）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｒｅｅ　ｃｌａｒｉｓ　ｃａｔｆｉｓｈ（Ｃｌａｒｉ￣ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ，Ｃｌｒｉａｓ／　ｃ　Ｌａｃｅｐｅｄｅ，ｍｕｌｅ　ｆｉｓｈ　Ｆ１）ａｔ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｗｅｒｅ　ｃａｒｒｉｅｄ　ｏｕｔ　ｗｉｔｈ　ｖｅｒｔｉｃａｌ　ｐｏｌｙａｅｒｙｌａｍｉｄｅ　ｇｅｌ　ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＰＡＧＥ）．Ｔｈｅ　ｋｉｎｄｓ，ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ　ａｎｄ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｒｅｅ　ｅｌａｒｉｓ　ｃａｔｆｉｓｈ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅ　ｉｒｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ｔｈｅ　ｉｒｏｎ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｃａｐａｃｉｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｉｒｏｎ　ｓａｔｕｒａｔｉｏｎ　ｄｅｇｒｅｅｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｏｆ　ｔｈｒｅｅ　ｃｌａｒｉｓ　ｃａｔｆｉｓｈ　ａｌｓｏ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅｒｅ　ｗｅｒｅ　ｔｗｏ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｗｈｉｃｈ　ｗｅｒｅ　ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ　ｂｙ　ｔｈｒｅｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｉｎ　Ｃｌａｒｉａｓ　ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ　ａｎｄ　ｍｕｌｅ　ｆｉｓｈ　ＦＩ，Ｗｈｉｌｅ　ｆｏｕｒ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓ　ｉｎ　Ｃｌａｒｉｓ　ｃ础Ｌａｃｅｐｅｄｅ．Ｔｈｅ　ｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｔｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ　ｉｓ　ｍｏｒｅ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｈｏｍｏｚｙｇｏｔｅ　ｉｎ　ａｌｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｔｈｒｅｅ　ｃｌａｒｉｓ　ｃａｔｆｉｓｈ．Ａｄｄｉｔｉｏｎａｌｌｙ，ｔｈｅ　ｉｒｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ：Ｃｌａｒｉａｓ　ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ＞Ｍｕｌｅ　ｆｉｓｈ　Ｆｌ＞Ｃｌａｒｉｓ　／　ｃ　Ｌａｅｅｐｅｄｅ；ｔｈｅ　ｉｒｏｎ　ｓａｔｕｒａｔｉｏｎ　ｄｅｇｒｅｅｓ：Ｃｌａｒｉａｓ　ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ＞Ｃｌａｒｉｓ　ｃ　Ｌａｃｅｐｅｄｅ＞ｍｕｌｅ　ｆｉｓｈ　Ｆｖｈ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　Ｃｌａｒｉａｓ　ｇａｒｉｅｐｉｎｕｓ　ｈａｓ　ａ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｌｏｗ　ｏｘｙｇｅｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｏｔｈｅｒ　ｔｗｏ　ｃｌａｒｉｓ　ｆｉｓｈｅｓ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ；ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；Ｃｌａｒｉｏｓ　ｇａｒｉｅｐｉｎｎｓ；Ｃｌａｒｉｓ　ｃ　Ｌａｅｅｐｅｄｅ；ｍｕｌｅ　ｃｌａｒｉｓ　ｆｉｓｈ　转铁蛋白是一种单体糖蛋白，包括血清转铁蛋白　复杂，等位基因也多，一般有５～１０个不等『Ｉ８ｌ。用ＰＡＧＥ分　析Ｔｆ多态性时，每种鱼类均有特定Ｔｆ条带的特定位置和　带型数目．Ｔｆ多态体是以一个位点上不同等位基因的组　合为基础来体现的口９／。　鱼类血清Ｔｆ多态性与鱼类耐低氧的生理功能密切相　关［２０１。其多态性对了解鱼类Ｔｆ的基因型分布特点以及鱼　类的生活习性十分重要。革胡子鲶是耐低氧的底栖鱼类，　１９８１年引入我国后能迅速适应当地环境并不断扩散开　来．种群不断扩大，可能会对当地生态环境产生不良影响，　（ＳＴ０　】、卵转铁蛋白（ＯＴｆ）ｔ￣、乳转铁蛋白（ＬＴｆ）ｔ３１、黑素转铁蛋　白（ＭＴｆ）ｔ４１以及Ｔｆ同源类似物的基因家族，相对分子量为　７０～８０　ｋｕ。Ｔｆ于１９４５年首次在人血清中发现圈，而后在鱼　类、鸟类等其他生物血清中也发现了Ｔｆ或是其同源类似　物，不同生物之间的Ｔｆ具有进化上的保守性和氨基酸序　列的同源性［句。Ｔｆ的主要功能是负责机体内Ｆｅ　的吸收、储　存和传递＿７Ｊ．此外还有维持核糖核苷酸还原酶的活性嗍和　能量平衡、抗菌杀菌【９Ｊ、保护细胞『ｌ０】、促进细胞分化和生　长［“１等作用。南囟巴＿１２１、鳕鱼【堋、巨口胭脂鱼【　、海七腮鳗＿ｌ　５ｌ、鲤　鱼　、鲫鱼［１６１、金鱼旧等鱼类Ｔｆ的多态性已被广泛研究，研　究结果表明血清转铁蛋白的多态性与鱼类耐氧能力以及　生活水层有密切关系．并且在鲤科鱼类当中其多态性最　收稿日期：２０１１－ｌ１—２２　本文对革胡子鲶、广东本地胡子鲶及其杂交子一代Ｆ　（革　胡子鲶６×本地胡子鲶早）Ｔｆ多态性和血清铁浓度进行研　究，以期为比较革胡子鲶、本地胡子鲶、杂交种的生存能力　强弱、建立生物入侵的评价体系提供参考。　１材料与方法　Ｌ１试验材料　基金项目：农业部农业生物资源保护与利用项目（２１３０１０８—１　１０６）　作者简介：夏敏（１９８６－），男，在读硕士生，Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｍｉｎｙｏｕｘｉａｎｇ＠　１６３．ｅｏｍ　供试鱼只取自珠江水产研究所。随机选取革胡子鲶　通讯作者：罗建仁（１９５６一），男，硕士，研究员，Ｅ—ｍａｉｌ：ｉｆｓｈｌｏ＠１６３．　ｎｅｔ　３０尾（生长时间一致），体长１３．０２（＋０．６１）ｅｍ，体重１３８．３３　（±０．５２）ｇ；本地胡子鲶３０尾，体长６．５６（±０．１９）ｅｍ，体重　１３４　表１　革胡子鲶、本地胡子鲶和杂交个体基因型频率（％）比较　表３　３种鲶鱼的多态信息参数　表２革胡子鲶、本地胡子鲶和杂交个体基因频率（％）比较　另外两种。　２．３血清转铁蛋白活性及铁利用率比较　分别测定了革胡子鲶、本地胡子鲶、杂交个体的血清　铁含量和总铁结合力，通过计算得到未饱和铁结合力和铁　饱和度（表４）。从表４可以看出，革胡子鲶的血清铁浓度最　高、为１６．７８　ｐ￣ｍｏｌ／Ｌ，本地胡子鲶最低、为１３．０４￣ｍｏｌ／Ｌ，说　各不相同，革胡子鲶　什＞ＴＰ，本地胡子鲶Ｔｆｆ＞ＴＰ＞ＴＰ，杂　交个体　＝　＞１］Ｐ。　从表３可以看出，本地胡子鲶的多态位点数最多，多　态位点比例最高、达５０％，革胡子鲶与杂交个体相似均为　４０％；平均杂合度本地胡子鲶最低，革胡子鲶与杂交个体　接近；多态信息含量３种鱼相差不大．杂交个体要略高于　明革胡子鲶的血清转铁蛋白活性要大于本地胡子鲶，杂　交个体处于两者之间：而在铁饱和度方面依然是革胡子　鲶最高、为２７．５２％，本地胡子鲶（２４．５７％）略高于杂交个体　（２３．２１％），说明３种鱼中革胡子鲶对铁的利用率最高，本　地胡子鲶次之，杂交个体的铁利用率最低。这与血清铁含　量的测定结果略有差别。　表４　３种鲶鱼血清转铁蛋白血清铁、铁结合力和铁饱和度测定结果　３结论与讨论　Ｔｆ的遗传多态性可作为一种有力的遗传标记，用于　鉴定种类，判断鱼类种质优劣［２３１。本研究结果表明，革胡子　鲶、杂交个体样品中未出现纯合体，本地胡子鲶中也只出　现ｃｃ基因型且远远小于杂合体的频率。在３种鲶鱼中杂　合体大于纯合体，说明３种鲶鱼的种质状况良好，革胡子　鲶的引入对本地胡子鲶种质未产生明显的影响。此外，杂　和宽度能代表样品中Ｔｆ的含量，其中黄颡鱼、革胡子鲶、　大菱鲆等底层鱼类，虽然条带不如鲸类以及鲤科鱼类丰　富，但其浓度即活性却较后者高．能适应底栖少氧的生活　环境。３种鲶的Ｔｆ分布范围相同，都集中在两个区域，并　且条带丰富程度基本相似。因此需主要比较其条带的深　浅与宽度，在Ｔｆ一区革胡子鲶Ｔｆ电泳条带的深度与宽度　明显高于其他２种，单位体积内Ｔｆ的含量要高，具有更高　的耐低氧能力。　转铁蛋白在血液中有双铁、单铁和无铁３种存在形　式．只有在与铁结合以后含铁蛋白才有相应的生理活性闭。　血清铁浓度、铁饱和度在临床上是诊断人类血液疾病的　重要指标，它们与血清转铁蛋白的活性存在明显的正比　关系，血清铁浓度高、铁饱和度高表明处于活性状态的转　交个体在Ｔｆ二区全部为ｂｃ基因型，而本地胡子鲶则有　ｂｃ、ＣＣ两种基因型，因此可采用Ｔｆ的多态性作为遗传标记　来区分本地胡子鲶与杂交鲶个体。　血红蛋白和肌血球素是跟呼吸作用密切相关的两个　主要蛋白．它们功能的实现都需要二价铁离子的参与，Ｔｆ　是生物体内负责铁离子运输、控制铁离子平衡的主要蛋　白．所以可以认为Ｔｆ生理功能的实现间接影响呼吸作用　能否正常进行。龙华等［１剐的研究结果也说明耐低氧鱼类Ｔｆ　多态性以及蛋白活性都要比不耐低氧的鱼类强。３种鲶鱼　的的血清转铁蛋白多态性分析结果显示它们的ＰＩＣ值接　铁蛋白比例高，结合氧气的能力强　。本试验中革胡子鲶　的血清铁浓度以及铁饱和度最高，说明其耐低氧能力比　本地胡子鲶以及杂交个体要强。　对鱼类血液的检测包括血细胞数量、血红蛋白浓度、　血清铁浓度以及转铁蛋白带谱等多个方面。这些指标是　近，杂交个体略高，日值也是杂交个体较高，这可能是一种　杂种优势的体现，革胡子鲶的多态信息含量略高于本地　胡子鲶．３种胡子鲶的多态信息数据相差不大，即条带丰　富程度基本持平．其中本地胡子鲶最低。另外，Ｔｆ带型分　布范围的宽窄和氧利用率的高低相关，分布范围宽则氧　利用率就高［２４１。冉春丽等［２５１的研究也表明电泳条带的深度　稳定和可采用的，可以在渔业生产上作为鱼类疾病或生　产性状的检测指标［２８１。本研究检测了血清铁浓度和转铁蛋　白带谱两方面，结果说明革胡子鲶相对本地胡子鲶具有　更强的竞争力．由于其生态位一致，同等条件下革胡子鲶　可能对本地胡子鲶的生存产生影响。　．　１３５　ａｓｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ　ｉｎ　ａｎ　ｉｎｔｒｏｄｕｃｅｄ　ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｂｉｇｍｏｕｔｈ　参考文献　ｂｕｆｆａｌｏｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｃｏｐｅｉａ，１９６７，４（８）：８０５－８０８．　［１Ｊ　Ｗｉｈｉａｍｓ　Ｊ．Ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｇｌｙｃｏｐｅｐｔｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｏｖｏｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｓｅＮｌｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｇ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｈｅｎ叨．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ，１９６８，１０８　（１）：５７—６７．　［２】ｓｔｉａｌｒｄａ　Ｂ　Ｊ，Ｃｏｌｌａｒｄ　Ｍ　Ｗ，Ｇｒｉｓｗｏｌｄ　Ｍ　Ｄ．Ａ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｌｉｋｅ（ｈｅｍ－　ｉｆｅｒｒｉｎ）ｍＲＮＡ　ｉｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｇｅｒｍ　ｃｅｌｌｓ　ｏｆ　ｒａｔ　ｔｅｓｔｉｓ叨．　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｃｅｌｌｕｌｒａ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９９１，１　１（３）：４４８－１４５３．　［３Ｊ　Ｒｅｙ　Ｍ　Ｗ，Ｗｏｌｏｓｈｕｋ　Ｓ　Ｌ，Ｂｏｅｒ　Ｈ　Ａ，ｅｔ　ａｉ．Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｓｅ—　ｑｕｅｎｃｅ　ｏｒ　ｈｕｍａｎ　ｍａｍｍａｒｙ　ｇｌａｎｄ　ｌａｅｔｏｆｅｒｒｉｎ【ＪＪ．Ｎｕｃｌｅｉｃ　Ａｃｉｄｓ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，１９９１，１８（１７）：５２８８—５２９２　【４１　Ｒｏｓｅ　Ｔ　Ｍ，Ｐｌｏｗｍａｎ　Ｇ　Ｄ，Ｔｅｌｏｗ　Ｄ　Ｂ，ｅｔ　ａ１．Ｐｒｉｍａｒｙ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ｏｆ　【１５］Ｂｏｆｆａ　Ｇ　Ａ，Ｆｉｎｅ　Ｊ　Ｍ，Ｄｒｉｌｈｏｎ　Ａ，ｅｔ　ａ１．Ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ　ａｎｄ　ｔｒｎｓａ－　ｆｅｒｒｉｎ　ｉｎ　ｍａｒｉｎｅ　ｌａｍｐｒｅｙ　ｓｅｒａ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９６７，２１４（９）：７００－７０２．　【ｌ６】Ｈ　Ｌｏｎｇ，Ｑ　ｘ　Ｙｕ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ　ａｎｄ　ｃＤＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｆｒｏｍ　ｃｒｕｃｉｎ　ｃａｒｐ，ａ　Ｃａｒａｓｓｉｕｓ　ｃｕｔｒａｔ／／￣ｓ［Ｊ］．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ａｎｄ　Ｃｅｌｌｕｌａｒ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００７，３０３（１）：　２０１—２０９．　【１７】Ｌ　Ｙａｎｇ，Ｌ　Ｚｈｏｕ，Ｊ　Ｆ　Ｇｕｉ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｐｏｌｙｍ－　ｏｒｐｈｉｓｍ　ｉｎ　ｇｏｌｄｆｉｓｈ［Ｊ］．Ｇｅｎｅｔｉｃａ，２００４，１２１（３）：３０３－３１３．　【１８］龙华，汤伏生．淡水鱼类血清转铁蛋白遗传多态性研究［Ｊ］．水产学　报　１９９６　２０（２）：１６８—１７４．　［１９】Ｖｅｒｓｐｏｏｒ　Ｅ．Ｓｐａｔｉａｌ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ａｌｌｅｌｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｉｎ　ａｔｌａｎｔｉｃ　ｓａｌｍｏｎ（Ｓ￣ｍｏ　ｓａｌａｒ）ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎｓ　ｆｒｏｍ　Ｎｏｒｔｈ　Ａｍｅｉｒｃａ［Ｊ］．　Ｃａｎａｄｉａｎ　ｊｏｕｒａｎｌ　ｏｆ　ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　ａｎｄ　ａｑｕａｔｉｃ　ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１９８６，４３（５）：　１０７４－１０７８．　ｔｈｅ　ｈｕｍａｎ　ｍｅｌａｎｏｍａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ａｎｔｉｇｅｎ　ｐ９７（ｍｅｌａｎｏｔｒｎｓａｆｅｒｒｉｎ）　ｄｅｄｕｃｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｍＲＮＡ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ［￣Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｎａｔｉｏｎｎａｌ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｕｎｉｔｅｄ　ｓｔａｔｅｓ　ｏｆ　Ａｍｅｒｃｉａ，１９８６，８３　（５）：１２６１－１２６５．　［５】Ｈｏｌｍｂｅｒｇ　Ｃ　Ｇ，Ｌａｕｒｅｌｌ　Ｃ　Ｂ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｓｅｒｕｍ　ｃｏｐｐｅｒ：ｎａｔｕｒｅ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｃｏｐｐｅｒ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｉｒｏｎ－ｂｉｎｄｉｎｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｉｎ　［２Ｏ】张辉，张俊权．鲤转铁蛋白和血清酯酶多态性研究［Ｊ］．水生生物学　报　１９９３，１７（３）：２７８—２８１．　［２１】李明云，张春丹．四种海水养殖鱼类血清转铁蛋白多态性的初步　ｈｕｍａｎ　ｓｅｕｍ［ｒＪ］．Ａｃｔａ　Ｃｈｅｍｉｃａ　Ｓｃｎｄｉａｎａｖｉｃａ，１９４５（１０）：９４４－９５０．　［６］郭春江，华川．转铁蛋白检测与临床应用【Ｊ】．华北煤炭医学院学　报，２００８，１０（１）：４２—４３．　［７］Ｗｅｌｃｈ　Ｓ．Ａ　ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓｔｕｃｒｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｆｒｏｍ　１７　ａｎｉｍａｌ　ｓｐｅｃｉｅｓ【Ｊ］．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｒｙ　研究Ｕ１．科技通报，２００９，２５（６）：７５３—７５７．　［２２］龙华，陈建武．拟缘鱼央血清转铁蛋白的研究　．水利渔业，２００６，２６　（２）：１０－１２．　［２３］甘云飞，邹青青．江西３种红鲤血清转铁蛋白遗传多态性Ⅲ．南昌　ａｎｄ　Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　Ｐａｒｔ　Ｂ，１９９７，１　１（３）：４１７－４２７．　［８】Ｂｉｄｌａｃｋ　Ｗ　Ｒ．Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　ｉｒｏｎ　ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ａｍｅ～　大学学报，２００８。３２（５）：４８６—４８８．　【２４］龙华，刘曼西．淡水养殖鱼类血清转铁蛋白耐低氧特性的研究［Ｊ］．　ｉｒｅａｎ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｎｕｔｉｒｔｉｏｎ，２００２，２１（３）：２９０－２９１．　［９　广野育生．９】鱼类的铁传递蛋白叨．鱼类病害研究，１９９８，２０（３）：８９－９６．　【１　ｏ］钱忠明．铁代谢——基础与临床　Ｅ京：科学出版社２０００：．１２３－１４７．　［１１】Ｓｔａｆｆｏｒｄａ　Ｊ　Ｌ，Ｂｅｌｏｓｅｖｉ　Ｃ　Ｍ．Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｎａｔｅ　ｉｍｍｕｎｅ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｏｆ　ｆｉｓｈ：ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａ　ｎｏｖｅｌ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｍａｅｒｏｐ—　华中理工大学学报。２０００．２８（１）：８５—８８．　【２５］冉春丽，龙华，杨健．瓶鼻海豚和糙齿海豚血清转铁蛋白的初步研　究［Ｊ】．水产学报，２００７，３１（４）：５５１－５５５．　【２６］Ｈｕｅｂｅｒｓ　Ｈ　Ａ，Ｃｓｉｂａ　Ｅ，Ｈｕｅｂｅｒｓ　Ｅ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｙ　ａｎｄ　ｒｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ　ｏｆ　ｉｒｏｎ．Ｓｅｃｔｉｏｎ　Ｉ：Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈａｇｅ　ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　ａｎｄ　Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，　２００３，２７（６）：５３９—５５４．　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｓ［Ｃ］．Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ　Ｃ　Ｉｎｃ，１９８２：　７７－７８．　【１２】Ｊａｍｉｅｓｏｎ　Ａ．Ａ　ｓｅｒｖｅｙ　ｏｆ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎｓ　ｉｎ　８７　ｔｅｌｅｏｓｔｅａｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．　Ａｎｉｍａｌ　Ｇｅｎｅｔｉｃ，１９９０，２１（３）：２９５－３０１．　【１３］Ｍｏｌｌｅｒ　Ｄ．Ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ｉｎ　ｃｏｄ［Ｊ］．Ｆｉｓｋｅｒｉｄｉｒ—　ｅｋｔｏｒａｔｅｔｓ　Ｓｋｒｉｆｔｌｉｇｅ　Ｓｅｒｉｅ　Ｈａｖｕｎｄｅｒｓｏｋｅｌｓｅｒ，１９６６，１４（５）：５１－６０．　【１４】Ｒｉｃｈａｒｄ　Ｋ　Ｋ，Ｄｏｎａｉｄ　Ｗ　Ｊ．Ｓｅｒｕｍ　ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ　ａｎｄ　ｓｅｒｕｍ　ｅｓｔｅｒ一　窜　－　宣　：§　ｊ　‘｝毫　夸譬　奎　窖　§ｋ　ｋｒ　ｋｊ　【２７］龙华，李谷，郑英．转铁蛋白研究与发展【Ｊ１．生物工程进展，２００１，２１　（２）：３２－３９．　［２８】龙华，陈建武，汪登强，等．１１种鲇形目鱼的血液检测与比较分　析［Ｊ】．安徽师范大学学报，２００６，２９（１）：５５—５９．　奄　宣ｋ，窜　，宣　毒　ｋ，　§　ｊ　宣　妊ｒ夸ｋ—窖　鲁　ｒ　ｋ　９ｋ　毫　奎ｋ　‘　－，奎　ｊ　－　ｋｒ，窜　，，奎　（上接第１３１页）　序列分析【Ｊ］．湖南农业科学，２００９（７）：８—１０．　【５】王利国，李玲，彭永宏．植物真菌致病基因的研究进展［Ｊ１．华南师　范大学学报。２００３（１）：１３５—１４２．　［６］高必达．真菌果胶酶的分子生物学研究进展［Ｊ１．生物工程进展，　２０００（２０）：１４－１９．　［７］Ｔａｌｈｉｎｈａｓ　Ｐ，Ｓｒｅｅｎｉｖａｓａｐｒａｓａｄ　Ｓ，Ｎｅｖｅｓ－Ｍａｒｔｉｎｓ　Ｊ，ｅｔ　ａ１．Ｍｏｌｅ—　ｃｕｌａｒ　ａｎｄ　ｐｈｅｎｏｔｙｐｉｃ　ａｎａｌｙｓｅｓ　ｒｅｖｅａｌ　ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｄｉｖｅｒｓｅ　Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ａｃｕｔａｔｕｍ　ｇｒｏｕｐｓ　ａｎｄ　ａ　ｌｏｗ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　Ｃ　ｇｌｏｅｏｓｐｏ—　Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ　ｃｉｎｇｕｌａｔａ的ｐｅｌＢ基因的同源性高达９８％。且　ＰＢｌ／ＰＢ２、ＣｇｌＡ／Ｃｇｌｂ对柑桔胶孢炭疽菌果胶裂解酶ｐｅｌＢ　基因有较高的特异性．Ｃｇ２ａ／Ｃｇ２ｂ对柑桔胶孢炭疽菌果胶　裂解酶ｐｅｌＢ基因的特异性稍差．但对胶孢炭疽菌果胶裂　解酶ｐｅｌＢ基因具有相对较高的特异性。柑桔果胶裂解酶　基因片段ｐｅＩＢ序列的获得，为后续炭疽菌的致病力分化　及柑桔对应的抗病基因的研究奠定了基础。　参考文献：　ｒｉｏｉｄｅｓ　ｗｉｔｈ　ｏｌｉｖｅ　ａｎｔｈｒａｃｎｏｓｅ［Ｊ１．Ａｐｐ　Ｅｎｖｉｒｏｎ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ，２００５，　７１：２９８７—２９９８．　【１】张红霞，江晓路，牟海滓，等．微生物果胶酶的研究进展『Ｊ】．生物技　［８　Ｇｕｏ　Ｌ　Ｄ，Ｈｙｄｅ８］　Ｋ　Ｄ，Ｌｉｅｗ　Ｅ　Ｃ　Ｙ．Ｉｄｅｎｔｉｉｆｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｎｄｏｐｈｙｔｉｃ　ｆｕｎｇｉ　ｆｒｏｍ　Ｌｉｖｉｓｔｏｎａ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　ｂａｓｅｄ　ｏ１＂１　ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　ｒＤＮＡ　术，２００５，１５（５）：９２—９５．　［２］王炎松，郭安平，章霄云，等．果胶酶基因片段的克隆及其序列分　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ￣１．Ｎｅｗ　Ｐｈｙｔｏｌｏｇｉｓｔ，２０００，１４７：６１７－６３０．　［９］Ｍｅｄｅｉｒｏｓｌ　Ｌ　Ｖ，Ｍａｃｉｅｌｌ　Ｄ　Ｂ，Ｍｅｄｅｉｒｏｓ１　Ｖ　Ｖ，ｅｔ　ａ１．ｐｅｌＢ　ｇｅｎｅ　ｉｎ　ｉｓｏｌａｔｅｓ　ｏｆ　Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ　ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｏｉｄｅｓ　ｆｒｏｍ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｈｏｓｔｓ田．　Ｇｅｎｅｔｉｃｓ　ａｎｄ　Ｍｏｌｅｅｕｌａｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２０１０，９（２）：６６１—６７３．　析【Ｊ１．生物技术通报，２０ｏ６（ｓ１）：３８１－３８６．　【３】李琦，谢达平，戴小阳，等．高产果胶酶细菌的筛选及其　２基因克　隆　．湖南农业科学，２００９（３）：１－３．　【４］李琦，戴小阳，刘正初，等．欧文氏菌Ｔ８５—１６６果胶酶基因克隆与　【１０１付丽．辣椒疫霉（Ｐｈｙｏｐｈｔｈｏｒａｃａｐｓｉｃｉ）ｌＯ个果胶裂解酶基因克隆及　ｐｃｐｅ１１的功能研究［Ｄ］．泰安：山东农业大学，２００９．