2024年3月20日发(作者:)
食品与发酵工业
FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES
DOI:10.13995/.11-1802/ts.025438
引用格式:宁亚维,侯琳琳,于同月,等.UPLC-MS/MS法快速测定乳酸菌发酵食品中的苯乳酸[J].食品与发酵工业,2021,47(5):
wei,HOULinlin,YUTongyue,eterminationofphenyllacticacidinlacticacidbacteriafer-
mentedfoodbyUPLC-MS/MS[J].FoodandFermentationIndustries,2021,47(5):174-179.
UPLC-MS/MS法快速测定乳酸菌发酵食品中的苯乳酸
宁亚维
1
,侯琳琳
1
,于同月
1
,刘茁
1
,杨正
1
,王志新
1
,贾英民
2∗
1(河北科技大学食品与生物学院,河北石家庄,050018)2(北京工商大学食品与健康学院,北京,100048)
摘 要 建立一种超高效液相色谱-串联质谱(ultraperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry,
UPLC-MS/MS)快速测定发酵食品中苯乳酸的方法,并利用此方法对45种乳酸菌发酵食品中苯乳酸的含量进行
流动相为0.3%甲酸-水和0.3%甲酸-乙腈,梯度洗脱,流速为0.4mL/min。苯乳酸在1~500ng/mL范围内线性
1.2%~4.4%。采用此方法对16种市售乳酸菌饮料、8种发酵乳、11种黄酒样品、发酵豆制品、米酒、奶酪、发酵
香肠、馒头、面包等食品中苯乳酸的含量进行测定,结果显示所有样品中均含有苯乳酸。该研究所建立的方法前
处理简单、分析时间短、灵敏度高、准确性好,适用于发酵食品中苯乳酸的测定。可以为高产苯乳酸菌株资源的
挖掘以及发酵食品品质与营养功能的进一步研究提供科学依据。
关键词 苯乳酸;UPLC-MS/MS;乳酸菌;发酵食品;黄酒
关系良好(R
2
=0.9999),检出限和定量限分别为0.3和1ng/mL,回收率为90.5%~105.0%,相对标准偏差为
测定。样品经甲醇提取,采用UPLC-MS/MS法,色谱柱为Shim-packXR-ODSC
18
(3.0mm×75.0mm,2.2μm),
苯乳酸(phenyllacticacid,PLA)是一种安全无
毒、对酸和热稳定、溶解性良好,能够在食品体系中均
匀扩散的多功能性天然有机酸
[1]
。苯乳酸具有广谱
抑菌作用,可有效抑制革兰氏阳性菌(如Staphylococ-
cusaureus、Listeriamonocytogenes、Bacillussubtilis等)、
革兰氏阴性菌(如Escherichiacoli、Salmonellaenterica、
Pseudomonasaeruginosa等)和真菌(如Colletotrichum
rytiscinerea等)
[2-4]
。此外,苯乳酸还可以发挥抑制
体外血小板聚集
[5]
、扩张冠状动脉
[6]
、治疗心肌梗
死
[7]
以及激活免疫
[8]
等生理作用。因此,苯乳酸在
食品防腐以及医药行业中具有广泛的应用前景。
苯乳酸可以通过微生物发酵产生
[9]
,已报道能
gloeosporioides、Aspergillusflavus、Aspergillusniger、Bot-
的分布情况,为菌株资源的挖掘提供科学依据。目
前,食品中苯乳酸的检测主要有GC-MS、HPLC、LC-
MS、2D-HPLC等方法,GC-MS法可以提高样品中苯
乳酸的分辨率,但样品需要进行酯化和萃取等繁琐复
杂的前处理
[19-21]
;HPLC法分辨率与灵敏度较低,最
低检出限为1.67mg/L,对于一些苯乳酸含量较低的
样品不能检出,且单个样品至少需要25min,分析时
间较长
[17]
;LC-MS技术克服了选择性低的缺点,最低
检出限可达0.16mg/L,但单个样品检测需要25~30
min,相对耗时较长
[14,18]
;而2D-HPLC对设备要求
高,程序复杂不宜实施,单个样品检测时间20min,其
间还需控制色谱阀的切换
[22]
。因此,上述技术在复
杂食品体系中苯乳酸定量分析方面均存在一定局限
性,如何高效地测定食品体系中苯乳酸的含量有待进
一步研究。超高效液相色谱(ultraperformanceliquid
离效果,MS/MS中的多反应监测(multi-reactionmoni-
chromatography,UPLC)能在短时间内实现良好的分
toring,MRM)模式可以显著提高信噪比。UPLC-MS/
MS兼具UPLC对复杂样品分离能力高效、分析检测
可以作为发酵食品中苯乳酸定量分析的有效工具。
因此,为了快速而准确地分析发酵食品中苯乳酸
够产生苯乳酸的微生物主要有植物乳杆菌、希氏乳杆
菌、明串珠菌属
[10-11]
、凝结芽孢杆菌、乳酸片球菌和
戊糖片球菌
[12-13]
等乳酸菌,相关的含苯乳酸的食品
有酸面团
[14-15]
、竹茶酒
[16]
、酸奶
[17]
、泡菜
[7]
、食
醋
[18]
等乳酸菌发酵食品。我国传统发酵食品种类丰
富,除泡菜、酸奶等食品外,发酵豆制品、发酵面制品
(馒头、面包等)、特色发酵酒类等发酵过程均有乳酸
菌的参与,因此有必要建立乳酸菌发酵食品中苯乳酸
的检测方法,以全面分析苯乳酸在乳酸菌发酵食品中
时间短,以及质谱MS灵敏度高和特异性强等优点,
基金项目:河北省重点研发项目(20327125D);河北省青年拔尖人才项目
收稿日期:2020-08-21,改回日期:2020-10-09
2021Vol.47No.5(Total425)
第一作者:博士,教授(贾英民教授为通讯作者,E-mail:jiayingmin@)
174
的含量,本文建立了苯乳酸的UPLC-MS/MS检测方
法,并用此方法对16种市售乳酸菌饮料、8种发酵
乳、11种黄酒样品、发酵豆制品、米酒、奶酪、发酵香
肠、馒头、面包等食品中苯乳酸的含量进行测定,以期
扩大筛选高产苯乳酸菌株的原料范围,以及为发酵食
品中优良菌株资源挖掘提供理论支持。
1
1.1
材料与方法
仪器
UPLC-20
ABSCIEX
岛津超高效液相色谱仪
QTRAP6500质谱仪
,日本岛津公司
,美国AB公司
;3-
;
18
旋涡混合器
K冷冻离心机
,广州仪科实验室技术有限公司
,德国Sigma公司;LABDANCER
;恒温摇
S25
床,上海智城分析仪器制造公司;JJ1000电子分析天
平,梅特勒-托利多仪器上海有限公司。
1.2 试剂和样品
Sigma
标准品:D-苯乳酸,纯度98%(色谱纯),美国
公司;发酵食品均随机采购于石家庄多家大型超市
公司;甲醇、乙腈、甲酸(色谱纯),德国Merck
。
1.
1.
3 实验方法
1.
3.
3.
1
1.
苯乳酸检测方法的建立
采用等度和梯度
1 流动相与洗脱条件的选择
2种洗脱方式对苯乳酸进行分
析
(A)
,先后选用乙腈
(A)
和0.1%甲酸
(A)
-水溶液
和水
(
(B)、0.
B)、0.3%
1%甲酸-乙腈溶液
虑分析时间
和0.3%
、峰形对称度和离子丰度等因素
甲酸-水溶液(B)做为流动相
甲酸-乙腈溶液
。
,
综合考
最终确
1.
定流动相及洗脱条件
3.1.2 质谱条件的选择
。
质谱通过对目标化合物苯乳酸母离子、碎片子离
子的识别实现对物质的定性和定量,采用电喷雾离子
166.
源进行离子化,考虑到苯乳酸是有机酸,分子量为
下,确定
17,离子模式选用了负离子模式
[M-H]
-
作为PLA的母离子
。
。
在全扫描模式
子离子扫描
时,选定2个丰度高并且稳定的子离子,在MRM模
1.
式下优化裂解电压和碰撞能
3.1.
配制质量浓度为
3 苯乳酸标准曲线的绘制及检出限的测定
。
1000ng/mL的苯乳酸标准储备
200、300、500
液,梯度稀释得到苯乳酸的浓度系列:1、10、50、100、
以峰
(ng
面积的
ng/mL。在确定的色谱条件下进样1μL,
乳酸的标准溶液
/mL)为横坐标
积分值为纵坐标,苯乳酸质量浓度
,用超纯水逐级稀释并测定
,绘制标准曲线。取低质量浓度苯
,根据S/N
1.
=
3.
3和
1.
S
4
/N
样品的前处理
=10确定检出限(LOD)和定量限(LOQ)。
称取10g(精确到0.01g)样品于20mL容量瓶
中(固态食品经研磨至均匀细粉后称取),加去离子
水定容
r
。然后向上述混合液中再加入3mL甲醇,240
最后取
/min条件下振荡
上清液过
10
0.22
min,10
μm
000
膜稀
r
释
/min
到
离心
线性
10
范围
min。
内
1.
待测
3.1.
。
分别将
5 精密度及稳定性实验
1.4、2.8、4.2mg/kg添加水平的苯乳酸
标准样品添加到含有苯乳酸的发酵乳样品[苯乳酸
含量(2.8±0.14)mg/kg]中,按照1.3.1.4小节进行
样品前处理,每个浓度做3个平行,每个样品平行进
样5次分析,计算平均回收率和相对标准偏差。同一
个样品于一天内5个不同时段进样分析,连续3d进
1.
行测定
3.2
,
实际样品的测定
取平均值并计算RSD值。
用已建立的UPLC-MS/MS检测法对采集于石家
庄各超市的8种活菌型乳酸菌饮料、8种灭菌型乳酸
菌饮料、8种发酵乳、11种黄酒、发酵豆制品、米酒、奶
酪、发酵香肠、馒头、面包等食品中的苯乳酸进行
测定。
1.4 数据处理
每个样品做3个独立平行,利用SPSS19.0软件
通过单因素方差分析法(P<0.05)对数据进行统计
分析,并通过OriginPro8软件对实验结果进行作图。
2
2.
结果与分析
2.
1
1.1
苯乳酸检测方法的建立
采用配备双泵和自动进样器的日本岛津高效液
流动相的选择
相色谱仪
XR-ODS
过对等度与梯度洗脱程序及甲酸添加量的探索
C
(UPLC-20)
mm
进行色谱分析
×75mm,2.2
,
μm)
使用
色谱柱
Shim-pack
18
(3.0
,
。
确定
通
10%
洗脱条件为梯度洗脱
~90%B;4~6min,90%
:0~1min,10%
B;6~6.1
B;1
min,90%
~4min,
10%
柱温和流速进行探索后
B;6.1~9min,10%B,进样量
~
mL/min;柱温:40℃。在此条件下
,确定最终条件为流速
:1μL。对不同的
,苯乳酸具有较好
:0.4
的分离效果
2.1.2
,在5min内出峰,且峰型良好。
采用
质谱条件的选择
QTRAP6500
配有
三重四极杆
电喷雾电
-线性离子阱复合质谱仪进
离源(ESI)的ABSCIEX
2021年第47卷第5期(总第425期)
175
食品与发酵工业
FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES
行分析,在全扫描模式下,确定[M-H]
-
作为苯乳酸
的母离子。采用仪器的自动调谐功能,将响应强度最
大的子离子设定为定量离子,响应强度较弱的子离子
118.
设定为定性离子,确定碰撞能质荷比(m/z)146.9和
MRM
8
别为-
模式下优化裂解电压均为
分别为苯乳酸的定量子离子和定性子离子
16V和-23V。最终确定质谱条件
-80V,碰撞电压分
,在
,离子源:
电喷雾离子源(ESI);扫描方式:负离子模式;多反应
监测(MRM);雾化气:氮气;雾化温度:500℃;雾化
气压力:70psi;辅助气压力:60psi;气帘器:35psi;喷
雾电压:-4500V。由10ng/mL标准样品的LC-MS
色谱图(图1)和提取离子流量色谱图(图2)的检测
结果可知,苯乳酸的出峰时间为3.11min,目标峰峰
型良好,说明优化的质谱条件适用于苯乳酸的检测。
图1 标准品LC-MS色谱图
Fig.1 LC-MSchromatogramofstandard
图2 标准品提取离子流量色谱图
Fig.2 Chromatogramofextractionflowrateofstandardsubstance
2.1.3
对1、10、50、100、200、300
线性范围、检出限、定量限的确定
和500ng/mL的苯乳
酸标准溶液进行定量分析,以标准品质量浓度为X
轴,以峰面积的积分值为Y轴,计算回归方程和相关
系数。标准曲线Y=15014X-9784.1,相关系数R
2
为0.9999,说明苯乳酸在1~500ng/mL范围内线性
关系良好。依据定量离子色谱峰的信噪比确定该方法
下苯乳酸的检出限和定量限分别为0.3和1ng/mL,显
著低于2D-HPLC方法的检出限(0.16μg/mL)和定量
限(0.52μg/mL)
[22]
,表明该方法具有较高灵敏度,能
176
2021Vol.47No.5(Total425)
2.
够满足食品中苯乳酸的检测需要
1.4 方法精密度测定
。
通过添加3个水平的苯乳酸标准样品到发酵乳
中,每个添加浓度重复5次,测定回收率量化该方法
的精密度。根据GB/T27404—2008《实验室质量控
制规范食品理化检测》中回收率的相关规定,被测组
分含量1~100mg/kg时,回收率范围在90%~110%
内实验结果可信。结果如表1所示,苯乳酸的平均回
收率为
(RSD
90.5%~105.0%,日内相对标准偏差范围
(RSD
r
)
密度、
R
重现性和稳定性
)
为
为
1.
1.
2%
3%~
~
4.
1.
4%
9%,日间相对标准偏差范围
,符合检测要求
,说明该方法具有良好的精
。发酵乳制品
的UPLC-MS色谱图和提取离子流图分别见图3和
图4,苯乳酸的出峰时间为3.11min,峰型良好且附
近没有杂质干扰,单个样品测定仅需要9min,回收率
测定结果具有较高的准确性和重复性。
表1 苯乳酸加标回收率
Table1 StandardrecoveryofPLA
标准品
日内精密度(n=5)
第1天2天第3天
日间精密
(mg·kg
添加量
-
/
1
)
平均回平均回平均回
收率/%
RSD
第
r
/
收率/%
RSD
r
/
收率/%
RSD
r
/
度
RSD
(n=
/
15)
R
%
1.
2.
4
4.
8
2
101.
90.5
2
1.
%
95.
105.0
1.
6
1.
2
9
99.
01.
%
104.
2
3
1.
3102.
93.
11.
%
1.
1.
5
996.
3
2
1.
5
1.
4
4
4.
3
2.
4
7
图3 发酵乳制品的UPLC-MS色谱图
Fig.3 UPLC-MSchromatogramoffermenteddairyproducts
图4 发酵乳制品的提取离子流量图
Fig.4 Extractionicflowoffermenteddairyproducts
与GC-MS
[19]
测定蜂蜜中苯乳酸的方法相比,预
处理简单;与LC-MS/MS
[18]
测定食醋中苯乳酸的方
法相比,灵敏度高,且节省时间和有机溶剂。因此,该
方法预处理简单、分析时间短、灵敏度高、准确性和重
现性良好,可有效应用于发酵乳制品中苯乳酸的
检测。
2.
2.
2
2.1
发酵食品中苯乳酸含量的分析
发酵乳通常是以羊乳或者牛乳等为发酵原料
发酵乳及乳饮料中苯乳酸含量的分析
,通
过乳酸菌发酵而成。推测发酵乳和乳酸菌饮料中可
能含有乳酸菌代谢产物苯乳酸。因此,本研究采用已
建立的UPLC-MS/MS法对8种市售活菌型乳酸菌饮
料、8种灭菌型乳酸菌饮料和8种发酵乳制品中苯乳
酸进行了测定,结果如表2所示:75%的样品苯乳酸
含量低于
mg
低于高效液相色谱对苯乳酸的检出限
/L。部分样品苯乳酸的含量为
4mg/L,仅有3种样品苯乳酸含量高于
0.03
,不能用高效液
~0.32mg/
18
L,
相色谱法检出。其中发酵乳中苯乳酸的含量明显高
于乳酸菌饮料,而所测大部分乳酸菌饮料和发酵乳中
苯乳酸含量较乳酸菌在乳酸菌MRS培养基中的产量
低
[10]
常较短
。
,
分析原因可能有
多数在4~6h之间
2方面
,尚未达到乳酸菌产苯乳
:发酵乳发酵时间通
酸高峰期;另外,尽管有些乳酸菌饮料在制备时发酵
时间较长可以达到72h,但乳酸菌饮料在制备过程中
需要加入水及多种物质进行稀释和调味,因此苯乳酸
浓度被高度稀释。苯乳酸具有广谱抑菌性,YU等
[17]
将高产苯乳酸的菌株PediococcuspentosaceusSK25应
用于发酵酸乳的研究,为产苯乳酸的乳酸菌作为酸奶
发酵剂用于制作具有长保藏期的酸奶提供了科学依
据。而发酵乳中苯乳酸含量的检测可为酸乳的品质
控制提供技术支持。
表2 市售乳酸菌饮料和发酵乳中苯乳酸含量
Table2 ContentofPLAincommerciallacticacidbacteria
beveragesandfermentedmilk
活菌型乳酸菌饮料
PLA含量/(mg·L
-1
灭菌型乳酸菌饮料
)
发酵乳
1
2
1.
10
90.172.
3
2.
81±0.09
11
2.
21
25
±
±
0.
0.
01
111.
02
4
8.
02±0.11
5
1.
34±0.42
18.
0.03±0.01
18
12
191.
42
±0.1
6
1.
19±0.06
130.
60206.
48
±0.07
7
1.
22±0.06
143.
31
±
±
0.
0.
93
02212.
14
±
±
0.07
8
0.
35±0.07
22.
32
4
±
±
0.
1.
02
12
154.
04±0.1522
161.
02
81
±
±
0.
0.
20
09
23
0.
54
24
1.
75
±
0.31
12
±
0.
±
0.
13
0.
04
30.06±1.52
06
2.2.2
黄酒是我国自古以来著名的传统粮食发酵酒
黄酒中苯乳酸的含量
,以
富含氨基酸的糯米、黍米等粮食为原料,经过酒曲复
式发酵方法酿造而成,且酒曲中除了酵母菌外还有乳
酸菌参与风味的形成
[23-25]
在苯乳酸。采集了11种以糯米为原料的不同品牌黄
,由此推测黄酒中可能存
酒,通过建立的UPLC-MS/MS方法,分析了黄酒中苯
乳酸含量。结果由表3所示,可知11种黄酒样品中
的8种样品中苯乳酸含量大于20mg/L。包装标注
陈酿时间对黄酒中苯乳酸含量的影响见图5,样品1
和样品
(
的黄酒中苯乳酸的含量相对较低
P<0.
4、
05),
样品
同种黄酒相比
2和样品7
,
之间均存在显著性差异
包装上标注陈酿时间长
,5年陈的黄酒相对
33.
于3年陈的黄酒苯乳酸含量分别降低21.37%和
竹茶酒的香气成分
81%。此外,有报道称苯乳酸是复合型保健黄酒
[16]
为2.61%,陈酿后苯乳酸含量相对降低了
,主发酵后苯乳酸的相对含量
1.8%,推
测在陈酿过程中有机酸可能促进酯化反应,增加黄酒
风味的酯香,从而使苯乳酸含量降低。但存在所测样
品量少、批次不同等问题,后续将深入研究黄酒原料
及发酵过程对苯乳酸含量的影响。
表3 黄酒中苯乳酸含量
Table3 PLAcontentinChinesericewine
样品
PLA/(mg·L
-11
样品1(3年陈)36.91±1.62
)
样品7(5
样品
年陈)
PLA
21.
/(mg·L
-
55±0.76
)
样品2(3年陈)32.56±1.54样品820.67±0.56
样品331.61±1.02样品911.24±0.32
样品4(5年陈)29.02±1.23样品108.38±0.21
样品525.11±0.98样品118.05±0.30
样品624.90±0.88
注:样品1和样品4,样品2和样品7属于同种品牌不同年份黄酒
图5 陈酿时间对黄酒中苯乳酸的影响
Fig.5
注:
Influence
∗∗∗
,P≤0.
of
001;
aging
∗∗
time
,0.001
on
<
PLA
P≤0.
content
01;
∗
,0.
in
01
Chinese
rice
05
wine
2.2.3
本课题组前期已经证实泡菜
其他乳酸菌发酵食品中苯乳酸的含量
、食醋等食品中含有
2021年第47卷第5期(总第425期)
177
食品与发酵工业
FOODANDFERMENTATIONINDUSTRIES
苯乳酸
[7]
在苯乳酸,
,
目前尚未有研究报道
然而其他乳酸菌发酵食品中是否广泛存
。因此,本研究通过
建立的UPLC-MS/MS方法测定了发酵豆制品、米酒、
奶酪、发酵香肠、馒头、面包等食品中苯乳酸的含量。
结果如表4所示,所用发酵食品中均有苯乳酸的检
出,其中发酵豆制品的苯乳酸含量相对较高,腐乳中
苯乳酸含量最高(22.79mg/kg)。推测原因为豆制
品中富含苯丙氨酸,而乳酸菌可以利用苯丙氨酸代谢
途径产生苯乳酸
[26]
较高,而发酵面制品中氨基酸含量低
,因此发酵豆制品中苯乳酸含量
,且目前馒头、面
包等发酵面制品生产中所用的微生物菌株以酵母菌
为主,乳酸菌含量较少,因此苯乳酸含量相应也较
低
[27]
研究结果与已报道的采用酸面团生产的发酵面制品
,如面包中苯乳酸含量最低(0.42mg/kg)。该
苯乳酸含量存在较大差异,如VAN等
[14]
研究显示酸
面团中苯乳酸的含量最高可达33.47mg/kg。由于
苯乳酸具有抑菌、提高免疫等多种功能特性
[28-29]
此建议发酵面制品中考虑回归传统的酸面团制作方
,因
式,即面制品制作中除添加酵母菌发酵外,增加功能性
乳酸菌以提高发酵面制品的功能特性。此外,上述检
测结果显示苯乳酸普遍存在于乳酸菌发酵食品中,可
为发酵食品中优良乳酸菌资源的挖掘提供理论参考。
表4 其他乳酸菌发酵食品中苯乳酸含量
Table4 ContentsofPLAinotherlacticacidbacteria
fermentedfoods
样品
PLA含量/(mg·kg
-1
腐乳22.79±0.96
)
米酒
样品
PLA含量
2.14
/(mg
±0.
·
65
kg
-1
)
豆瓣酱12.40±0.42奶酪1.53±0.04
酱油17.03±0.33发酵香肠0.82±0.02
豆豉2.04±0.12馒头0.54±0.02
酱油20.43±0.01面包0.42±0.01
3 结论
建立UPLC-MS/MS方法对乳酸菌发酵食品中苯
乳酸的含量进行测定,样品仅需有机溶剂预处理,操
作简单,检测时间短,灵敏度高,准确性和重复性好,
可用于基质复杂食品中苯乳酸的检测,并首次在黄
酒、发酵豆制品和发酵面制品中检测到苯乳酸。用此
方法测定出24种市售乳酸菌饮料和发酵乳中均含有
苯乳酸,其中发酵乳中苯乳酸的含量显著高于灭菌型
乳酸菌饮料;所检测的11种黄酒中,72.7%的样品苯
乳酸含量大于20mg/L,批次、陈酿时间可能对黄酒
中苯乳酸含量产生影响;发酵豆制品、米酒、奶酪、发
178
2021Vol.47No.5(Total425)
酵香肠、馒头、面包等发酵食品中均有苯乳酸的检出,
说明苯乳酸可能普遍存在于乳酸菌发酵食品中。本
研究扩大了筛选高产苯乳酸菌株的原料范围,为发酵
食品中优良菌株的选育提供理论支撑,也为发酵食品
的品质与营养功能进一步研究提供科学依据。
参考文献
[1] 刘韵昕
范大学
.苯乳酸的抑菌活性及抑菌机理研究[
LIUYX.
,2017.
D].临汾:山西师
Antibacterialactivityandmechanism
[2]
lactic
DIEULEVEUX
acid[D].Linfen:Shanxi
ofactionofphenyl-
spectrumandtarget
V,LEMARINIER
Normal
siteofD-3-phenyllactic
S,GUÉGUEN
University,2017.
acid[
M.
J].
Antimicrobial
[3]
Journal
LAVERMICOCCA
ofFoodMicrobiology,1998,40(3):177
of
P,VALERIOF,VISCONTIA.
-
Antifungal
183.
International
activity
[4]
Applied
phenyllactic
李兴峰
研究与应用
,
and
江波
Environmental
acidagainstmolds
,潘蓓蕾.新型生物防腐剂
Microbiology,2003,69(1):634
isolatedfrombakeryproducts[J].
———苯乳酸在食品中的
-640.
LI
phenyllactic
XF,JIANG
[J].
acid
B,
食品与发酵工业
as
PAN
anovel
BL.
,2007,33(5):87-91.
biopreservative:A
Researchandapplicationinfoodof
[5]
Fermentation
金昔陆
性的影响
,陈滨凌
Industries,2007,33(5):87
review[J].Foodand
,吴卫江,等.8种丹参素衍生物对兔血小板聚集
-91.
JIN
derivatives
XL,CHEN
[J].上海医科大学学报,2000,27(3):181-182.
onrabbit
BL,WU
platelet
WJ,et
aggregation
s
[J].
of
Journal
eightDanshensu’
of
s
[6]
Medical
王珏英
University,2000,27(3):181-182.
Shanghai
究
WANG
[J].
,
上海医科大学学报
邵以德,张渊博,等
,1991,18(4):295
.β-苯基乳酸对心血管系统的实验研
β-phenyllactic
JY,SHAOYD,ZHANGYB,mental
-297.
studiesof
[7]
Medical
LI
University,1991,18(4):295
acidonthecoronarysystem[
-297.
J].JournalofShanghai
acid
X,NING
naturally
Y,LIU
occurring
D,et
in
al.
Chinese
Metabolic
pickles
mechanism
[J].
ofphenyllactic
[8]
2015,186(1):265
FoodChemistry,
KIM
-270.
phenyllactic
DW,KIM
crobial
acid
J
on
H,KANG
growth
HK,ysupplementationof
[9]
[J].
population,andmeat
performance,immune
qualityattributesof
response,cecal
broilerchickens
mi-
NICOLINE
Journal
strates
V,G
ofApplied
GM,F
Poultry
VR.
Research,2014,23(4):661-670.
DSM20451(T)
onphenylalaninemetabolism
Influence
of
of
Lactobacillus
peptidesupply
sanfranciscensis
andcosub-
[10]
of
VALERIO
Agriculturaland
and
Food
Lactobacillus
Chemistry,2006,54(11):3
plantarumTMW1.468[
832
J].Journal
of
lection
phenyllactic
F,LAVERMICOCCA
-3839.
ofstrains
acid
P,PASCALEM,tion
contributing
bylacticacid
tofood
bacteria:Anapproachtothese-
[11]
FEMS
刘长建
Microbiology
qualityandpreservation[J].
研究
,刘秋,姜波
Letters,2004,233(2):289
,等.泡菜中乳酸菌的分离及其苯乳酸产量
-295.
LIU
tyof
C
[J].大连民族学院学报,2014,16(3):245-248.
lactic
J,LIU
acid
Q,JIANG
bacteria
B,et
from
lacticacid-producingactivi-
[12]
Dalian
pickledvegetable[J].Journalof
郁书怀
Nationalities
[D].
.
University,2014,16(3):245-248.
YU
drogenases
S
无锡
片球菌属乳酸菌乳酸脱氢酶生物合成苯乳酸的研究
ch
:江南大学
fromPediococcus
on
,2013.
phenyllactic
species
acid
of
production
lacticacid
by
bacteria
lactate
[
dehy-
D].
[13]
[14]
Wuxi:JiangnanUniversity,2013.
MUW,YUS,ZHUL,researchon3-phenyllactic
acid,abroad-spectrumantimicrobialcompound[J].AppliedMicro-
biologyandBiotechnology,2012,95(5):1155-1163.
VANDERMEULENR,SCHEIRLINCKI,VANSCHOORA,et
tiondynamicsandmetabolitetargetanalysisoflacticacid
bacteriaduringlaboratoryfermentationsofwheatandspeltsour-
doughs[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,2007,73
(15):4741-4750.
MATTHEWRLA,FABIODB,MICHAELC,fication
ofphenyllacticacidinwheatsourdoughusinghighresolutiongas
chromatography-massspectrometry[J].JournalofAgriculturaland
FoodChemistry,2009,57(3):1060-1064.
李昱鼎.竹茶酒发酵工艺优化及抗氧化特性研究[D].福州:福
建农林大学,2013.
nfermentationtechniqueofbamboo-teawineandits
antioxidantactivities[D].Fuzhou:FujianAgricultureandForestry
University,2013.
YUS,ZHOUC,ZHANGT,ommunication:3-phenyl-
lacticacidproductioninmilkbyPediococcuspentosaceusSK25dur-
inglaboratoryfermentationprocess[J].JournalofDairyScience,
2015,98(2):813-817.
吴仁蔚,陈亨业,郭俊陆,等.食醋中苯乳酸的提取、鉴定及含量
比较[J].中国酿造,2020,39(1):66-70.
WURW,CHENHY,GuoJL,tion,identificationand
contentcomparisonofphenyllacticacidinvinegar[J].ChinaBrew-
ing,2020,39(1):66-70.
WILKINSAL,LUY,tableorganicsubstances
fromNewZealandunifloralmanuka(Leptospermumscoparium)
honeys[J].Taylor&Francis,2015,32(1):3-9.
DIMITROVAB,GEVRENOVAR,isofphe-
nolicacidsinhoneysofdifferentfloraloriginbysolid-phaseextrac-
tionandhigh-performanceliquidchromatography[J].Phytochem
Analysis,2007,18(1):24-32.
′
PM,JERKOVIC
′
I,TUBEROSOCIG,owerKUS
(CentaureacyanusL.)honeyqualityparameters:Chromatographic
fingerprints,chemicalbiomarkers,antioxidantcapacityandothers
[J].FoodChemistry,2014,142(1):12-18.
张雯,林毅侃,黄雨晴,等.在线二维高效液相色谱法测定发酵食
品中的苯乳酸[J].食品与发酵工业,2020,46(9):243-249.
ZHANGW,LINYK,HUANGYQ,ishmentandappli-
cationofatwodimensionalhighperformanceliquidchromatography
methodforphenyllacticacidinfermentedfood[J].FoodandFer-
mentationIndustries,2020,46(9):243-249.
CAIH,ZHANGQ,SHENL,icprofileandantioxidant
activityofChinesericewinefermentedwithdifferentricematerials
andstarters[J].LWT-FoodScienceandTechnology,2019,111
(1):226-234.
ZHOUW,FANGR,ofgallicandprotocatechuic
acidsonthemetabolismofethylcarbamateinChineseyellowrice
winebrewing[J].FoodChemistry,2017,233:174-181.
WANGP,MAOJ,MENGX,sinflavourcharacteristics
andbacterialdiversityduringthetraditionalfermentationofChinese
ricewinesfromShaoxingregion[J].FoodControl,2014,44:58-63.
BUSTOSAY,FONTDEVALDEZG,zationof
phenyllacticacidproductionbyPediococcusacidilacticiCRL1753.
Applicationoftheformulatedbio-preservercultureinbread[J].
BiologicalControl,2018,123:137-143.
张国华.不同地区传统面食发酵剂中菌群结构及优势菌种代谢
的研究[D].杭州:浙江大学,2014.
ialcommunitiesintraditionalsourdoughsfrom
differentareasofChinaandmetabolicactivityofdominantmicroor-
ganism[D].Hangzhou:ZhejiangUniversity,2014.
WANGJP,YOOJS,LEEJH,sofphenyllacticacid
onproductionperformance,eggqualityparameters,andbloodchar-
acteristicsinlayinghens[J].JournalofAppliedPoultryResearch,
2009,18(2):203-209.
COWLEYS,MAHONYJ,tperspectives
onantifungallacticacidbacteriaasnaturalbio-preservatives[J].
TrendsinFoodScience&Technology,2013,33(2):93-109.
[22]
[15] [23]
[16] [24]
[25]
[26]
[17]
[18]
[27]
[19]
[20]
[28]
[29]
[21]
ABSTRACT Ultraperformanceliquidchromatography-tandemmassspectrometry(UPLC-MS/MS)wasestablishedtodeterminephenyl-
lacticacid(PLA)infoodfermentedbylacticacidbacteria,s
weredeterminedbyUPLC-MS/separatedonShim-packXR-ODSC
18
(3.0mm×75.0mm,
2.2μm)bygradientelutionwith0.3%formicacid-acetonitrileand0.3%formicacid-aqueous,andtheflowratewas0.4mL/
showedagoodlinearitywiththeconcentrationrangedfrom1to500ng/mL(R
2
=0.9999).Thelimitsofdetectionandquantitationwere
0.3and1ng/mL,overiesrangedfrom90.5%to105.0%,andtherelativestandarddeviationsvariedfrom1.2%to
4.4%.ThedevelopedmethodwasappliedtothedeterminationofPLAinfermentedfoodincluding16lacticacidbacteriafermentedbevera-
ges,8fermentedmilks,11Huangjiu,fermentedbeanproducts,ricewine,cheese,fermentedsausage,steamedbread,bread,andother
hodestablishedinthisstudyistimesavingforsamplepretreatment,
highsensitivityandaccuracy,udyprovidesscientificbasisforthe
screeningofPLAhigh-producingbacteriaandfurtherresearchonthequalityandnutritionalfunctionoffermentedfood.
Keywords phenyllacticacid;UPLC-MS/MS;lacticacidbacteria;fermentedfoods;Huangjiu(Chinesericewine)
2021年第47卷第5期(总第425期)
1(CollegeofFoodScienceandBiology,HebeiUniversityofScienceandTechnology,Shijiazhuang050018,China)
2(SchoolofFoodandHealth,BeijingTechnologyandBusinessUniversity,Beijing100048,China)
Rapiddeterminationofphenyllacticacidinlacticacidbacteria
fermentedfoodbyUPLC-MS/MS
NINGYawei
1
,HOULinlin
1
,YUTongyue
1
,LIUZhuo
1
,YANGZheng
1
,
WANGZhixin
1
,JIAYingmin
2∗
179
发布者:admin,转转请注明出处:http://www.yc00.com/web/1710887333a1832789.html
评论列表(0条)