2024年5月18日发(作者：苹果台式机主机)

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产品简介：

产品编号 产品名称 产品包装 产品价格

D2632 pCMV-C-Flag 1μg 798.00元

pCMV-C-Flag是碧云天自行研发的用于在哺乳动物细胞中表达C端和Flag tag(Flag标签)融合的目的蛋白的表达质粒。含有CMV启动子可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达；在多

克隆位点的3'端含有一个可以编码Flag标签的序列，因此可以表达出含有Flag标签的融合蛋白，可以方便地使用抗Flag的抗体来识别目的蛋白，有利于目的蛋白检测和分离纯化。质粒为

卡那霉素抗性。转染细胞后，可使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

pCMV-C-Flag质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide Position

CMV promoter 1–602

T3 promoter and T3 primer binding site 620–639

multiple cloning site 680-740

c-Flag tag 741-764

T7 promoter and T7 primer binding site 817–838

SV40 polyA signal 850–1233

f1 origin of ss-DNA replication 1371–1677

bla promoter 1702–1826

SV40 promoter 1846–2184

neomycin/kanamycin resistance ORF 2219–3010

HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal 3011–3469

pUC origin 3598–4265

pCMV-C-Flag质粒的图谱如下：

pCMV-C-Flag的多克隆位点的详细图谱如下：

XmaI PstI

SacI Small BamHI HindIII

651 GAGCTCCACC GCGGTGGCGG CCGCTCTAGC CCGGGCGGAT CCAAGCTTCT

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CTCGAGGTGG CGCCACCGCC GGCGAGATCG GGCCCGCCTA GGTTCGAAGA

Flag

EcoRI EcoRV SacI BglII XhoI XbaI D Y K D

701 GCAGGAATTC GATATCGTCG ACAGATCTCT CGAGTCTAGA GATTACAAGG

CGTCCTTAAG CTATAGCAGC TGTCTAGAGA GCTCAGATCT CTAATGTTCC

tag

D D D K ApaI

751 ATGACGACGA TAAGTAAGGG CCCGGTACCT TAATTAATTA AGGTACCAGG

TACTGCTGCT ATTCATTCCC GGGCCATGGA ATTAATTAAT TCCATGGTCC

pCMV-C-Flag中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pCMV-C-Flag)包括：

Afl II Age I Ahd I Asc I Bbs I Bbv II Blp I

Bsg I BsiW I BsmB I BspM II BsrG I BssH II Bst1107 I

BstE II Ear I Eco47 III Eco72 I EcoN I Esp I Fse I

Nru I PflM I Pme I Pml I PpuM I Psp1406 I Sap I

Sca I Spe I

pCMV-C-Flag中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pCMV-C-Flag once)包括：

Nde I CA`TA,TG 241

SnaB I TAC|GTA 347

Nhe I G`CTAG,C 598

Sac I G,AGCT`C 656

Sac II CC,GC`GG 663

BstX I CCAN,NNNN`NTGG 664

Not I GC`GGCC,GC 669

PspA I C`CCGG,G 681

Xma I C`CCGG,G 681

Srf I GCCC|GGGC 683

Sma I CCC|GGG 683

BamH I G`GATC,C 688

Hind III A`AGCT,T 694

Pst I C,TGCA`G 704

EcoR I G`AATT,C 706

EcoR V GAT|ATC 714

Sal I G`TCGA,C 718

Acc I GT`MK,AC 719

Bgl II A`GATC,T 724

PaeR7 I C`TCGA,G 730

Xho I C`TCGA,G 730

Xba I T`CTAG,A 736

Bsp120 I G`GGCC,C 769

Apa I G,GGCC`C 773

pCMV-C-Flag质粒中推荐使用的测序引物序列如下：

T3 primer(620–639): 5′AATTAACCCTCACTAAAGGG 3′

T7 primer(817-838): 5′GTAATACGACTCACTATAGGGC 3′

Pvu I CG,AT`CG 851

Bcl I T`GATC,A 1005

Mun I C`AATT,G 1098

Hpa I GTT|AAC 1111

Mlu I A`CGCG,T 1234

Dra III CAC,NNN`GTG 1464

Sfi I GGCCN,NNN`NGGCC 2123

BseR I GAGGAG 16/14 2166

Stu I AGG|CCT 2169

Cla I AT`CG,AT 2188

Kas I G`GCGC,C 2347

Nar I GG`CG,CC 2348

Ehe I GGC|GCC 2349

Bbe I G,GCGC`C 2351

Msc I TGG|CCA 2430

Tth111 I GACN`N,NGTC 2466

BsrD I GCAATG, 8 2581

Bsp1286 I G,DGCH`C 2651

Rsr II CG`GWC,CG 2864

BsiC I TT`CG,AA 3030

BstB I TT`CG,AA 3030

Bsa I GGTCTC 7/11 3337

HgiE II ACCNNNNNNGGT-1/13 3677

ApaL I G`TGCA,C 3952