2024年4月1日发(作者：华为p40pro手机怎么样)
检测分析
DOI
：
10.12161(.l005-6521.2021.09.022
食品研究与开发
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
151
—
甜叶菊花和叶中酚类成分分析及含量测定
谢虹
，
陈云
，
梁建生
(扬州大学生物科学与技术学院
，
江苏扬州
225009
)
摘
要
：
以高效液相色谱-串联四极杆质谱分析仪,结合质谱分析及比对对照品或文献报道化合物的保留时间和质
谱参数
，
在甜叶菊花和叶中鉴定了
16
种酚类化合物
。建立一种利用高效液相色谱法测定甜叶菊中
16
种酚类化合物
含量的方法
，
并对甜叶菊一新品种盛花期花和叶中酚类的含量进行测定
。
结果表明
，
甜叶菊花和叶中酚酸化合物以新
绿原酸、绿原酸
、
隐绿原酸
、
异绿原酸
B
、
异绿原酸
A
、
异绿原酸
C
为主
，异绿原酸
A
含量最高
，
绿原酸含量次之;花和
叶中类黄酮化合物主要为芦丁、
梅皮素
-7-0
-葡萄糖昔
、
木犀草素
-7-0
-葡萄糖昔
、
木犀草素-
7-0
-芸香糖昔
、
橱皮
素
-3
-
0-
木糖昔
、
梆皮素
-3-0
-鼠李糖昔、
芹菜素
-7-0-
葡萄糖昔
、
山奈酚
-3-0-
阿拉伯糖昔、
山奈酚
-3-0
-鼠李糖昔
，
欄■皮素
-3-0-
鼠李糖昔含量最高
；
盛花期甜叶菊花和叶中酚类总量达
(
22.31±0.51)mg/g
和
(
91.11±2.32
)
mg/g
。
关键词:甜叶菊
；
花;叶;酚类;绿原酸类;类黄酮
；高效液相色谱法
(HPLC)
Analysis
and
Determination
of
Phenolic
Compounds
in
Flowers
and
Leaves
of
Stevia
rebaudiana
Bertoni
XIE
Hong,
CHEN
Yun,
LIANG
Jian-sheng
(
College
of
Bioscience
and
Biotechnology
,
Yangzhou
University,
Yangzhou
225009,
Jiangsu
,
China)
Abstract
：
A
novel
method
that
utilized
high
-performance
liquid
chromatography
-tandem
quadrupole
mass
spectrometric
analysis
identified
a
total
of
16
phenolic
compounds
from
the
flowers
and
leaves
of
a
new
variety
of
Stevia
rebaudiana
Bertoni
by
comparing
the
retention
times
and
mass
spectra
of
samples
with
reference
sub
stances
and
publications.
The
major
phenolic
acids
were
neochlorogenic
acid
,
chlorogenic
acid
,
cryptochloro-
genic
acid,
isochlorogenic
acid
B,
isochlorogenic
acid
A,
and
isochlorogenic
acid
C.
A
and
isochlorogenic
acid
A
with
the
higest
content
,
followed
by
chlorogenic
acid.
The
major
flavonoids
in
the
flower
and
leaf
were
rutin
,
quercetin
-7
-0
-glucoside
,
luteolin
-7-0
-glucoside
,
luteolin
-7
-0
-rutinoside
,
quercetin
-3
-0
-xyloside
,
quercetin
-3
-0
-rhamnoside
,
apigenin
-7
-0
-glucoside
,
kaempferol
-3
-0
-arabinoside
,
kaempferol
-3
-0
-
rhamnoside
and
quercetin-3-0-rhamnoside
with
the
higest
content
in
the
flower
and
leaf.
Total
contents
of
phe
nolic
compounds
reached
(
22.31
±0.51)
mg/g
in
S.
rebaudiana
Bertoni
flowers
and
(
91.11±2.32
)
mg/g
in
leaves
during
the
flowering
phase.
Key
words
：
Stevia
rebaudiana
Bertoni
;
flower
;
leaf
;
phenolic
compounds
;
chlorogenic
acids
;
flavonoids
;
high
performance
liquid
chromatography
(
HPLC
)
引文格式
：
谢虹
，
陈云
，
梁建生.甜叶菊花和叶中酚类成分分析及含量测定
[J].
食品研究与开发
,2021,42(9):151-157.
XIE
Hong,
CHEN
Yun,
LIANG
Jiansheng.
Analysis
and
Determination
of
Phenolic
Compounds
in
Flowers
and
Leaves
of
Stevia
rebaudiana
Bertoni[J].
Food
Research
and
Development
,2021,42(9
)
:
151-157.
甜叶菊
(
Stev
ia
re
b
audiana
Bertoni
)
为菊科
(
Com-
中含有低热值和高甜度的甜菊糖昔
(
steviol
glycosides,
positae)
斯台比亚属
(S/e
”
ia)
多年生草本植物
，
因叶片
SGs)
而得到人们的高度关注叫
SGs
是一类二话糖昔类
化合物的总称
，
甜度约为蔗糖甜度的
300
倍
，
因而作为
一种天然来源的
“
甜味剂
”
被广泛应用于食品和饮料
基金项目
：
国家自然科学基金
(32071947
)
作者简介:谢虹(
1968
—
)
,
女(汉)，
讲师
，
硕士研究生
，
研究方向:天
然产物研究与开发
。
工业現
SGs
还可治疗糖尿病
、
牙科疾病
、
肥胖病
、
高血压
和癌症等疾病叫
甜叶菊中含有
30
鉢浓
g
各异的
SGs,
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
食品研究与开发
检测分析
—
152
其中甜菊昔
(stevioside
,
St)
和瑞鲍迪昔
A(rebaudioside
A,
RA
洽量最丰富叫研究表明
，
酚类是甜叶菊中另一类含
量丰富的活性物质
,
甜叶菊中酚类主要有酚酸和类黄
酮两类
，
而酚酸主要包括绿原酸类化合物叫国内对甜
叶菊酚类的研究多集中在叶片绿原酸类化合物含量
的测定方面凹
，
而有关类黄酮成分分析及含量测定研
究帥
。
甜叶菊属于短日照植物
，
在长日照下只有长茎叶
进行营养生长
。当日照逐渐缩短
,
其才能现蕾开花进
入生殖生长阶段㈣
。
以
St
含量高的甜叶菊品种为材料
的研究表明
SGs
含量在现蕾初期达到最高
，开花后
SGs
含量明显下降仙,因此甜叶菊产地多以田间群体
10%~20%
的植株现蕾作为最适采收期凹,因而产业界
至今未挖掘甜叶菊花的经济价值
。
上世纪末,甜叶菊
栽培品种随着市场需求经历了从高
St
向高
RA
含量
及高
RA/St
比的品种更替，罗庆云等回的研究结果表
明高
RA
甜叶菊品种叶的采收可在现蕾至种子成熟时
段进行
。
作为植物精华的鲜花除具有观赏价值外
,
还
含有丰富的类黄酮
、
酚酸
、
氨基酸
、
微量元素和维生素
等活性成分
，
具有食用和药用价值问
。
本文以甜叶菊的
花和叶为研究对象
，
鉴定其酚类成分并测定含量
，
为
建立甜叶菊多指标质量评价体系和扩大甜叶菊开发
应用提供依据
。
1
材料与方法
1.1
试验材料
甜叶菊花(去苞片)
、
叶片:江苏宝莲生物科技有限
公司甜叶菊种植基地
,55
T
过夜烘干后研磨成细粉,
过
50
目筛,备用
。
1.2
试剂与仪器
新绿原酸
、
隐绿原酸
、
1
,3
-二咖啡酰奎宁酸
、
异绿
原酸
A
、
异绿原酸
B
、
异绿原酸
C
对照品:成都曼思特
生物科技有限公司;榊皮素
-7-0
-葡萄糖昔对照品:上
海源叶生物科技有限公司;木犀草素
-7-0
-葡萄糖昔
、
榊皮素
_3-0
-鼠李糖昔对照品
：
索莱宝生物科技有限
公司
;
绿原酸
、
芹菜素
-7-0
-葡萄糖昔
、
芦丁对照品:成
都瑞芬思生物科技有限公司
;
榊皮素
-3-0-
木糖昔
、
山
奈酚
-3-0
-鼠李糖昔
、
山奈酚
3-0
-阿拉伯糖昔对照
品
：
四川省维克奇生物科技有限公司
。
以上对照品均
为色谱纯(质量分数均大于
98%)
。
甲酸(色谱纯):天
津科密欧化学试剂有限公司
；
乙睛(色谱纯)
：
瑞典
0CEANPAK
公司
；
甲醇(分析纯)
：
国药集团化学试
剂有限公司
；
固相萃取试剂盒
(
2
mL)
：
安捷伦科技有
限公司
。
高效液相色谱
(1260
)
-
串联四极杆质谱分析仪
(6460Triple
Quad
LC/MS
)
、高效液相色谱仪
(1200
)
：
安
捷伦科技有限公司
;
电子天平
(
AI204
)
:
梅特勒-托利
多公司
；
电热鼓风干燥箱
(
DHG-9141A
)
:德国美墨尔
特公司;冰冻离心机
(5804R
)
：
德国艾本德公司
。
1.3
试验方法
1.3.1
供试品溶液
分别称取甜叶菊的花粉末
5.00
g
和叶粉末
1.00
g,
各加入
30
mL
甲醇,超声辅助浸提
30
min,
6
000
r/min
离心
10
min,
取上清
，沉淀加入
30
mL
甲醇超声辅助重
复浸提
2
次
，
每次
30
min,
合并
3
次浸提的上清液并定
容至
100
mL,
得甲醇浸提液
。
取
1
mL
浸提液置于固相
萃取试剂盒中旋涡振荡
3
min,
9
000
r/min
离心
8
min,
取上清用
10%
乙睛稀释至合适的浓度
，
过
0.22
gm
微
孔滤膜
，得供试品溶液
。
1.3.2
高效液相色谱-质谱鉴定酚类化合物
1)
液相色谱条件:色谱柱:
Agilent
Eclipse
XDB-C
18
(
2.1
mmxl50
mm,
5
|jLm);
流动相
：
乙睛
(
A
)
-0.5%
甲酸
水
(
B),
梯度洗脱程序
(
0~5
min,
5%-10%
A;5
min-
40
min
：
10%
~
34%
A;
40
min
~
45
min,
34%
~
95%
A;
45
min
〜
47min,95%
A;47
min
〜
48
min
,
95%
〜
5%
A;
48
min
~
60
min,
5%
A
);
流速:
0.3
mL/min
;
柱温
：
25
T
;
进样量
JO
piL
o
2
)
质谱条件:电喷雾离子源
(
electron
spray
ioniza
tion^
Si),
1E/^
离子扫描检测模式;扫描范围
必
：
50~
1000;
毛细管电压
：
4kV
(正)
、
3
・
5kV
(负)汗燥气体温
度
:
300
T
,
干燥气体流速:
10
L/min
;
鞘气温度
：
132
£,
鞘气流速
：
7
L/min;
雾化器压力:
103
kPa
。
1.3.3
高效液相色谱法检测酚类含量
1.3.3.1
色谱条件
色谱柱:
Sepax
GP-Ci
S
(
4.6
mmx250
mm,
5
jim);
流动
相
：
0.5%
甲酸水溶液
(A)-
乙睛
(
B
)
,
梯度洗脱程序
(
0
~
5
min,
5%
~
10%
B;5
min
~
40
min
：
10%
~
34%
B;
40
min
~
44
min
,
34%
~
95%B;44
min
〜
48
min
,
95%
~
5%
B
)
;
流速
：
0.9
mL/min;
检测波长
：
330nm
;
柱温
：
35
咒
；
进样量
：
20
応
。
1.3.3.2
线性关系
精密称取新绿原酸
、
绿原酸、
隐绿原酸
、
1,3
-二咖
啡酰奎宁酸
、
芦丁
、
榊皮素
-7-0
-葡萄糖昔
、
木犀草素-
7_0_
葡萄糖昔
、
榊皮素
_3_0_
木糖昔
、
异绿原酸
B
、
异
绿原酸
A
、
榊皮素
-3-0
-鼠李糖昔
、
芹菜素
-7-0
-葡萄
糖昔
、
山奈酚
-3-0
-阿拉伯糖昔
、
异绿原酸
C
、
山奈酚
-
3-0
-鼠李糖昔
15
个对照品适量
,
置于
25
mL
容量瓶
中
，
加甲醇超声辅助溶解定容后得混合对照品溶液
，
检测分析
食品硼硼发
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
153-=-
用
10%
乙睛溶液按比例稀释成相应的浓度梯度进行高
进行测定
，
采用外标法计算酚类含量
（平行测定
3
份,
取平均值
）
。因无木犀草素
-7-0-
芸香糖昔的对照品
，
效液相色谱
（
high
performance
liquid
chromatography
,
HPLC
）
分析
。
1.3.3.3
精密度
、
重复性
、
稳定性和加样回收率试验
取
“
1.3.3.2
”
项下制备混合对照品溶液重复进样
5
次
，
以峰面积计算
15
种酚类的相对标准偏差
（
圮
lative
其含量的计算以木犀草素
-7-0
-葡萄糖昔的峰面积及
浓度为基准梅公式如下
。
#>/
（
mg/g
）
=
（
C/IF
）
x
（
）
x
1.33
式中:
C
为木犀草素-
7-0-
葡萄糖昔对照品的浓
standard
deviation
,
RSD
仪器精密度
。
取甜叶菊
度
,mg/mL;£
为木犀草素
-7-0
-葡萄糖昔对照品峰面
样品按
“
131
”
项下方法制备供试品溶液
，
平行
5
份
，
按
积凹为样品的干质量,为样品中木犀草素
-7
-
“
133.1
”
项下色谱条件进行测定,以峰面积计算
15
种
酚类的
RSD
值评估该方法重复性
。
取甜叶菊供试品溶
液
，
分别于
0
、
4
、
8
、
12
、
24
h
进行测定,以峰面积计算
15
0
-芸香糖昔峰面积;
1.33
为木犀草素-
7-0
-芸香糖昔
与木犀草素-
7-0
-葡萄糖昔分子质量之比
。
1.4
数据处理
试验数据使用
Microsoft
excel
软件和
SPSS
16.0
统
计分析软件进行整理与分析
。
种酚类的
RSD
值评估供试品溶液稳定性
。
精密称取已
知含量的同一批样品适量
，
共
9
份
，
每
3
份为一组
，
分
别精确加入低
、
中
、
高浓度的对照品溶液适量
，
按
“
1.3.1
”
项下方法制备供试品溶液
，
再按
“
133.1
”
项下
色谱条件进行测定并幡加样回收率
。
2
结果与讨论
2.1
甜叶菊中酚类物质的鉴定
试验采用正
/
负离子模式对甜叶菊的叶和花中提
1.33.4
甜叶菊花和叶中酚类含量测定
以
2019
年种植的甜叶菊一新品种盛花期
（
生长
取成分进行扫描
，
图
1
是样品在正
/
负模式下的质谱总
160d
）
10
个植株混合叶和混合花为材料
，按
“
131
”
项
下方法制备供试品溶液
，并按
“
1.3.3.1
”
项下色谱条件
9
-
离子流图
（
total
ion
chromatogram
,
UC
）
o
峰
1
、
2
和
3
的分子离子峰
［
M-H
片均为
m/z
353,
初
8
-
0
------
1
_
1
_
1
_
1
___
1
_
1
_
1
_
1
___
1
_
1
_
1
_
1
_
_
_
1
_
1
_
1
_
1
____
1
_
1
_
1
_
1
_
'
2
4
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24
26
28
30
32
34
36
38
40
42
44
46
4S
50
52
54
56
58
60
保留时间
/min
峰
1~16
为供试品中检测出的酚类化合物
。
S1
甜叶菊供试品总离子流图
1^.1
TIC
of
sample
of
Stevia
rebaudiana
Bertani
步判断为单咖啡酰奎宁酸
。
3
个峰的特征离子
m/zl91
和加
zl79
分别为失去咖啡酸部分和奎宁酸部分的碎
片离子，
滋
173
为奎宁酸进一步失去
H
2
0
的碎片离子;
10.1K15
分别为新绿原酸
（
3
-咖啡酰奎宁酸
）
、
绿原酸
（
5
-咖啡酰奎宁酸
）
、
隐绿原酸
（
4
-
咖啡酰奎宁酸
）、
异
绿原酸
B
（
3
,4
-二咖啡酰奎宁酸
）
、
异绿原酸
A
（
3
,5
-二
咖啡酸可以和奎宁酸的
1
、
3
、
4
和
5
位上的径基
（
-0H
）
脱水缩合
，
形成
4
种单咖啡酰奎宁酸
。
峰
4
、
10
、
1
1
和
咖啡讎宁酸
）
、
异绿原酸
C
（
4,5
-二咖啡讎宁酸
）
。
另
外
，
根据张维冰等网的文献
、
峰的保留时间及对照品确
定峰
4
为
1,3
-二咖啡酰奎宁酸
。
在以往的研究中尚未
15
的分子离子峰为
mlz
515,
特征离子
mlz
353
为失去咖啡酸及进一步失去
H
2
0
的碎片离子
，初
步判断这
4
个峰均为二咖啡昵宁酸;两分子咖啡酸与
奎宁酸脱水缩合
，
理论上与奎宁酸羟基
（
-0H
）
结合位
见甜叶菊中含有
1,3
-二咖啡酰奎宁酸的报道叮叫
峰
5
、
6
、
9
和
12
均含有特征离子
mlz
303,
推测是棚
皮素糖昔化合物
。
峰
5
的分子离子峰
［
M-H
］
-
为
mlz
置可能有
1
,3-
、
1
,4-
、
1
,5-
、
3,4-
、
3,5-
和
4,5
-六种网
。
609,
特征离子
mlz
611
和
m/z303
分别为
［
M+H
］
+
和失
去了芸香糖
（
葡萄糖
+
鼠李糖
）
的碎片离子;峰
6
分子
通过参阅参考文献
［
1-2,
6
］
及对照品确定峰
1
、
2
、
3
、
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
食品研究与开发
检测分析
—
154
离子峰
［
M-H
］
-
为
mlz
463,
特征离子
m/z
465
和
m/z303
分别为
［M+H
］
+
和失去了半乳糖或葡萄糖的碎片离子;
峰
9
分子离子峰
［
M-H
］
-
为
m/z
433,
特征离子
m/z
303
为
［
M+H
］
+
失去了木糖的碎片离子;峰
12
分子离子峰
［
M-H
］
-
为
mlz
447,
特征离子
mlz
449
和
zn/z303
为
［
M+
町和失去了鼠李糖的碎片离子
。
Bairoso
等嚨过高效
液相色谱串联质谱技术鉴定到了葡萄牙产甜叶菊中
榊皮素糖昔化合物包括芦丁
、
桝皮素
-0-
葡萄糖昔
、
梆
皮素
-3-0-
木糖昔
、
桝皮素
-3-0
-鼠李糖昔
。
峰
7,8,14
和
16
的均含有特征离子
m/z
287,
推测
可能是木犀草素或山奈酚糖昔化合物
。
由于木犀草素
的极性大于山奈酚的极性
，所以在反相液相色谱分离
中
，
一般木犀草素糖昔化合物的保留时间小于山奈酚
糖昔化合物的保留时间
，
因此可以初步判断峰
7
和
8
为木犀草素糖昔化合物
。
峰
7
的分子离子峰为
m/z
447,
特征离子
m/z
287
为
［
M+H
］
+
失去了半乳糖或
葡萄糖的碎片离子
。
峰
8
的分子离子峰
［
M-
町为
m/z
593,
特征离子
mlz
595
和
m/z287
分别为
［
M+H
］
+
和失去
了双糖的碎片离子
。
Ciulu
等冋在甜叶菊的酚类鉴定研
究中推测
［
M
-
町
为
m/z
593
的分子离子峰可能是木犀
草素
_7_0_
芸香糖昔或山奈酚
_3_0
-芸香糖昔
，
本研
究以分子量同为
594
的木犀草素
-7-0
-新橙皮糖昔和
山奈酚
-3-0
-芸香糖昔对照品进行
HPLC
分析
，
山奈
酚
-3-0-
芸香糖昔峰的出峰时间比峰
8
的出峰时间滞
后
2.175
min,
而木犀草素
-7-0
-新橙皮糖昔比峰
8
的
出峰时间提前
0.971
min,
因此判断峰
8
应为木犀草素
-
7-0
-芸香糖昔
。
峰
14
和
16
的分子离子峰
［
M-
町分别
为
m/z
417
和
m/z
431,
特征离子
m/z
287
为
［
M+H
］
*
失
去了阿拉伯糖和
［
M
+
町
失去了鼠李糖的碎片离子
。
峰
13
的分子离子峰
［
M-H
］
-
为加
431,
特征离子
m/z
271
为
［
M+
町失去了半乳糖或葡萄糖的碎片离子
。
本研究通过对照品确定峰
5
、
6
、
7
、
8
、
9
、
12
、
13
、
14
、
16
分别为芦丁
、
榊皮素
-7_0
-葡萄糖昔
、木犀草素-
7_0_
葡萄糖昔、木犀草素
_7_0
-芸香糖昔
、
桝皮素-
3-0-
木糖昔
、
桝皮素
-3-0_
鼠李糖昔
、
芹菜素
-7_0
-葡
萄糖昔
、
山奈酚
-3-0-
阿拉伯糖昔、
山奈酚
-3-0
-鼠李
糖昔
。
2.2
色谱条件的选择
鉴于植物提取物成分多而复杂,
为了有效进行组
分分离
,
必须对分离条件进行优化
,
不同的分离参数
包括色谱柱
、
流动相组成和检测波长等需通过试验确
定。本试验比较了
Agilent
Eclipse
XDB
、
Dubhe
、
Sepax
GP
、
Welch
Ultimate
XB
、
Thermo
scientific
ODS
Hypersil
、
DikMa
Diamonsil
等
Ci
8
色谱柱的分离效果
，
结果表明
采用
Sepax
GP-C
18
色谱柱
，
分离效果最好
。
从正
/
负离
子模式下甜叶菊样品的总离子流图中提取
200
nm~
440nm
波长范围内的色谱图进行比较
，
如图
2
所示
。
由图
2
可知
，
大多数峰在
330
nm
处有最大吸收
。
对
高效液相流动相的组成进行考察
，
结果表明使用乙
月青-水溶液作为流动相组成比甲醇-水溶液流动相组
成的分离效果好,在流动相中加入少量的甲酸
,
色谱峰
更尖锐
，
并能有效减少色谱峰拖尾现象的产生。
以乙
睛
-0.5%
甲酸作为流动相
,
调整流动相比例
,
在
40
min
内可以实现多种成分的有效分离
。
2.3
线性关系考察
将
15
种酚类对照品混合溶液配制成相应的浓度
梯度后
，
进样分析
,
以质量浓度为横坐标,
峰面积为纵
坐标
，
绘制系列标准曲线
,15
种酚类的相关系数
If
为
0.999
0~1,
线性良好
，
结果见表
1
。
2.4
精密度
、
重复性
、
稳定性和加样回收率试验
精密度试验中
15
种酚类的
RSD
值在
0.17%
~
1.56%
之间
，
表明该仪器精密度良好;重复性试验中
15
种酚类的
RSD
值在
0.80%~1.35%
之间
，
表明该方法
重复性良好
；
稳定性试验中该
15
种酚类的
RSD
值在
0.76%~2.31%
之间
，
表明供试品溶液在
24
h
内保持稳
定
；
加样回收率试验中
15
种酚类的平均回收率在
85.60%~9&
80%
之间
。
2.5
甜叶菊花和叶中酚类化合物含量测定
甜叶菊花和叶中酚类化合物含量的检测结果见
表
2
。
由表
2
可以看出
，
甜叶菊叶片中含量最高的酚酸
化合物为异绿原酸
A,
其次是绿原酸
，
而异绿原酸
B
、
新绿原酸
、
隐绿原酸含量较少
,1,3
-二咖啡酰奎宁酸
含量最低
;
花中同样是异绿原酸
A
含量最高
,
绿原酸
的含量次之
，
而异绿原酸
C
和异绿原酸
B
的含量相
当
，
隐绿原酸和
1,3
-二咖啡酰奎宁酸含量较少
。
花和
叶中酚酸总量分别达到
(14.61
±0.25)
mg/g
和
(
71.42±
2.01)
mg/g
。
甜叶菊花和叶的类黄酮主要以类黄酮昔的形式
存在
,
为榊皮素
、
木犀草素
、
山奈酚以及芹菜素的糖昔
衍生物
。
在叶片中
，
除了山奈酚
-3-0
-阿拉伯糖昔和
山奈酚
-3-0-
鼠李糖昔的含量少于花中的含量
，
其他
7
种黄酮昔的含量均高于花中的含量
，
花和叶均以榊
皮素
_3
-鼠李糖昔的含量最高。
花和叶中类黄酮总量
分别达
(
7.70±0.26)
mg/g
和
(
19.69±0.31)
mg/g
。
自
Karakose
等閃采用液相色谱串联质谱在甜叶菊
叶发现了
24
种酚类化合物后
,
Barroso
等问采用
HPLC
法测定葡萄牙产甜叶菊叶片中新绿原酸
、
绿原酸
、
隐
检测分析
食品硼硼发
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
155
-
—
花样品
保留时间
/min
].新绿原酸;
2
.绿原酸;
3
.隐绿原酸;
4.1,
3
-二咖啡酰奎宁酸;
5
.芦丁;
6
.襯皮素
-7-0-
葡萄糖昔;
7
.木犀草素
-7-0-
葡萄糖昔;
8
.木犀草素
-7-0
雀
香籟
；
9
.槨皮素
;
10
.异绿原酸
B
;
11
.异绿原酸
A
；
•皮素
-3-0
-鼠
Wff
；
13
.核素
-7-0-
葡萄欄
;
14.
山奈酚
-3-0-
阿拉伯
糖昔
；
15
.异绿原酸
C
；
16
.山奈酚
-3-0-
鼠李糖昔
。
图
2
对照品和甜叶菊供试品高效液相色谱图
Fig.
2
HFLC
chromat^rams
of
reference
substances
and
Stevia
nbaudiana
Bertoni
sarnies
表
1
15
种酚类化合物的回归方程
、相关系数和銭性范围
Table
1
Regression
equation
,
correlation
coefllden
and
linear
rai^e
of
fifteen
phenolic
compounds
序号
1
2
3
中文名称
英文名称
neochlorogenic
acid
回归方程
尸
99.026»-2.602
5
尸
8
&
903
兀
+28.839
y=66.784«+1.546
相关系数
R2
1
0.999
8
0.999
9
0.999
6
0.999
4
0.999
0
0.999
3
0.999
6
0.999
8
0.999
9
0.999
5
线性范围
/(jxg/mL)
0.22^56.00
卿原酸
绿原酸
卿原酸
1,3
-二咖啡酰奎宁酸
chlorogenic
acid
cryptochlorogenic
acid
0.50-128.00
0.25-16.00
4
5
l,3-dica£feoylquinic
acid
/=88
・
252x+5
・
608
0.28^18,00
芦丁
rutin
尸
2&742%+7.291
4
y=32.616x+8.171
8
y=65.065^+28.511
0.3422.00
0.28^-18.00
0.37^-24.00
0.25^-16.00
0.50-32.00
1.50-96.00
6
7
椭皮素
-7-0-
葡萄粉
quercetin-7-O-glucoside
luteolin-7-0-gluco3ide
木犀草素
-7-0-
葡萄糖昔
懈皮素
-3-O-7KW
8
9
10
11
quercetin-3-O-xyloside
isochlorogenic
acid
B
尸
49.W+10.582
7=79.678^+10.822
异绿躺
B
异绿原酸
A
梆皮素
-3-0-
鼠李糖昔
isochlorogenic
acid
A
quercetin-3-O-Aamnoside
apigenin-7-0-glucoside
尸
101.1&C+21.561
尸
44.9W+18.61
^=80.553^+25.106
0.50-32.00
12
13
核素
-7-0-
葡萄胳
山奈酚
-3-0
-阿拉伯糖昔
0.999
3
0.999
2
0.999
8
0.999
1
0.28^18,00
0.25-16.00
kaempferol-3-O-arabinoside
y=51.982x+15.069
y=101.36%+40.79714
15
isochlorogenic
acid
C
137^88.00
0.28^-18.00
山奈酚
-3-0
-鼠李糖昔
kaempferol-3-O-rhanmosidey=50.103%+13.541
—
156
2021
年
5
月
第
42
卷第
9
期
食品研究与开发
表
2
甜叶菊花和叶中酚类化合物含量的检测结果
检测分析
Table
2
Detection
results
of
phenolic
compounds
contained
in
flower
and
leaf
of
Stevia
rebaudiana
Bertoni
酚类
酚酸
中文名称
英文名称
neochlorogenic
acid
chlorogenic
acid
一
含量
/(mg/g)
花
0.29±0.01
叶
1.09±0.15
新绿原酸
绿原酸
2.59±0.03
0.10±0.01
16.51±1.44
0.60±0.08
0.01±0.00
隐绿原酸
1,3
-二咖啡酰奎宁酸
cryptochlorogenic
acid
1
,3
—
dicaffeoylquinic
acid
isochlorogenic
acid
B
isochlorogenic
acid
A
isochlorogenic
acid
C
0.05±0.00
0.90±0.03
9.76±0.10
异绿原酸
B
异绿原酸
A
异绿原酸
C
类黄酮
1.87±0.01
41.88±2.77
9.46±0.91
2.68±0.14
0.92±0.04
0.34±0.02
芦丁
榊皮素
-7-0-
葡萄朋
rutin
quercetin-7-O-glucoside
luteolin-7-0-glucoside
0.37±0.02
0.99±0.11
2.03+0.10
木犀草素一
7-0
-葡萄糖昔
木犀草素一
7_0
-芸香糖昔
榊皮素-
3-0-
木糖昔
tf
皮素
-3-0
-鼠李瞬
0.20+0.01
luteolin-7-O-rutinoside
1.21±0.05
0.23±0.01
2.44±0.06
1.40±0.07
quercetin-3-0-xyloside
quercetin-3-0-rhamnoside
0.45±0.03
8.19±0.21
1.86±0.01
0.62±0.04
1.47±0.09
芹菜素
-7-0
-葡萄帕
apigenin-7-0-glucoside
0.18±0.03
0.89±0.04
山奈酚-
3-0
-阿拉伯朋
山奈酚-
3-0-
鼠李糖昔
kaempfierol-3-O-arabinoside
kaempferol-3-O-rhamnoside
1.84±0.03
14.61±0.25
酚酸总量
total
content
of
phenolic
acids
total
content
of
flavonoids
total
content
of
phenolic
ompounds
71.42±2.01
19.69±0.31
类黄酮总量
酚类总量
7.70±0.26
22.31±0.51
91.11±2.32
绿原酸、
异绿原酸
B
、
异绿原酸
A
、
异绿原酸
C
的含量
分别为
0.55%
、
5.
10%
、
0.29%
、
0.55%
、
4.92%
、
1.08%,
绿
菊花和叶中的
16
种酚类物质,包括新绿原酸
、
绿原酸
、
隐绿原酸、
1,3
-二咖啡酰奎宁酸
、
异绿原酸
B
、
异绿原
酸
A
、异绿原酸
C
等
7
种酚酸化合物和芦丁
、
榊皮素_
原酸类总量达
12.49%;
郭志龙等冏采用
HPLC
检测国内
14
个甜叶菊品种叶片中新绿原酸
、绿原酸
、
隐绿原酸
、
异绿原酸
B
、
异绿原酸
A
、
异绿原酸
C
的最高含量分别
为
0.46%,3.29%
、
0.3
1
%,0.32%,5.43%,
1.95%
，
绿原酸
7-0
-葡萄糖昔
、
木犀草素
-7-0
-葡萄糖昔、
木犀草素-
7-0
-芸香糖昔
、
楣■皮素
-3-0-
木糖昔
、
楣•皮素
-3-0
-
鼠
李糖昔、
芹菜素
-7-0
-葡萄糖昔
、
山奈酚
-3-0-
阿拉伯
类成分总量最高的品种可达
9.78%
。
上述研究均显示
糖昔
、
山奈酚
-3-0
-鼠李糖昔等
9
种类黄酮化合物
。
甜叶菊中酚酸化合物主要包括
6
种绿原酸类
，
其中主
要成分均为绿原酸
、
异绿原酸
A
和异绿原酸
C,
绿原
酸类成分是甜叶菊中一类含量较高的次生代谢产物
,
本研究建立了
HPLC
同时测定甜叶菊花和叶中
16
种酚类含量的方法
，
运用该方法测定了花和叶中的
酚类化合物的含量
。
花和叶中酚酸化合物均以异绿原
酸
A
的含量最高
,1,3--
咖啡酰奎宁酸含量最少
。
花
这一结论在本研究的甜叶菊品种中也成立(表
2)
。
关
于甜叶菊类黄酮化合物,
Barroso
等冏通过
HPLC-
质谱
鉴定出了芦丁
、
桝皮素
-3-0
-葡萄糖昔
、
山奈酚
-3-0-
和叶中类黄酮化合物均以桝皮素
-3-0
-鼠李糖昔的含
量最高
，
花中以芹菜素
-7-0
-葡萄糖昔含量最少
,
而叶
中以榊皮素
-3-0
-木糖昔含量最少
。
花和叶中含有丰
葡萄糖昔、
榊皮素
-3-0-
木糖昔
、
榊皮素
-3-0-
鼠李糖
昔
，
推测了
1
种桝皮素糖昔化合物及
4
种山奈酚糖昔
化合物
，
并指出类黄酮化合物中以榊皮素
-3-0
-鼠李
糖昔含量最高
(
9.29
mg/g),
这一结果在本研究中得以
验证;本研究除了同样鉴定出了芦丁
、
桝皮素
-3-0
-木
富的酚类化合物,甜叶菊的叶可以作为提取酚类成分
的原料
,
而甜叶菊的花可以开发成为新型保健食品。
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BARROSO
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ment
of
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糖昔
、
桝皮素
-3-0
-鼠李糖昔外
，
还鉴定出了
2
种山奈
酚
、
2
种木犀草素和
1
种芹菜素的糖昔化合物,但没有
鉴定出榊皮素
-3-0
-葡萄糖昔和山奈酚
_3_0_
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加工编辑:张璐
收稿日期:
2020-12-03
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