2024年3月27日发(作者：索尼电视24小时服务)

荧光分光光度f7000细胞内钙离子浓度测定

荧光分光光度法是一种常用的细胞内离子浓度测定方法之一，

特别适用于测定细胞内钙离子浓度。在本文中，将介绍荧光分

光光度法测定细胞内钙离子浓度的原理、步骤和应用。

一、原理

荧光分光光度法利用荧光探针与目标离子之间的相互作用，通

过检测荧光强度来测定细胞内离子浓度。荧光探针是一种能够

与特定离子结合的化合物，当与离子结合时，荧光探针的荧光

性质会发生改变，从而可以测量到荧光信号的强弱。

对于细胞内钙离子浓度的测定，通常会使用钙选择性荧光探针

Fura-2或Fluo-3。这两种荧光探针在与钙离子结合后，荧光发

射峰会发生位移。其中，Fura-2在结合钙离子后的荧光发射峰

位移从380 nm至500 nm，而Fluo-3在结合钙离子后的荧光发

射峰位移从510 nm至540 nm。

二、步骤

1. 细胞处理：将待测细胞种植在培养皿中，使其附着于培养皿

底部。然后，用含有钙选择性荧光探针的培养基处理细胞，使

荧光探针能够进入细胞内。

2. 荧光探针染色：将细胞孵育在荧光探针染色溶液中一段时间，

确保荧光探针能够与细胞内的钙离子结合。

3. 荧光信号测定：使用荧光分光光度仪进行荧光信号测定。将

含有染色细胞的培养皿放置在荧光分光光度仪样品舱中，选择

相应的激发波长和检测波长，然后开始记录荧光信号。

4. 数据分析：使用荧光分光光度仪软件对测得的荧光信号进行

数据分析。根据荧光信号的强度，可以计算出细胞内钙离子的

浓度。

三、应用

荧光分光光度法测定细胞内钙离子浓度在许多生物学研究领域

都有广泛的应用。

1. 生物医学研究：钙离子是细胞内重要的信号转导分子，参与

调节许多生理过程，如细胞增殖、迁移、分化等。测定细胞内

钙离子浓度可以揭示这些生理过程的调节机制。例如，在研究

神经元突触传递过程中，测定细胞内钙离子浓度可以了解神经

元活动的程度和时间。

2. 药物筛选：荧光分光光度法可以在药物筛选过程中用于测定

药物对细胞内钙离子浓度的影响。许多药物可以通过干扰细胞

内钙离子浓度来调节细胞功能。通过测定细胞内钙离子浓度的

变化，可以评估药物的效果和毒副作用。

3. 环境毒理学：荧光分光光度法可以用于测定细胞内钙离子浓

度对环境毒物的响应。一些化学品和环境污染物可以通过影响

细胞内钙离子浓度来引起细胞毒性。测定细胞内钙离子浓度的

变化可以用于评估这些毒物对细胞的影响和安全性。

综上所述，荧光分光光度法是一种可靠、灵敏且非破坏性的细

胞内钙离子浓度测定方法。通过该方法，可以了解细胞内钙离

子浓度的变化，揭示生物学过程的调节机制，并在生物医学研

究、药物筛选和环境毒理学等领域中有广泛的应用。