2024年4月13日发(作者：)

ctab法提取dna流程

CTAB法是一种常用的DNA提取方法，它能够从植物、真菌、昆虫等

样品中高效地提取DNA。本文将介绍CTAB法提取DNA的主要步骤

及注意事项。

1. 样品制备

首先，需要准备好待提取的样品。对于植物样品，应在新鲜或经过冷

冻保存的样品中选取新生叶片或芽。对于昆虫样品，应选取腹部组织

或头部组织，并将其切碎。

2. 组织破碎

将样品放入研钵中，并加入适量的液氮使其快速冷冻。然后使用研钵

和研杵将样品彻底破碎，直到完全成为粉末状。

3. 细胞裂解

将粉末转移到离心管中，并加入适量的CTAB缓冲液和蛋白酶K，混

合均匀后放入65℃水浴中静置30分钟左右。此过程中CTAB缓冲液

能够裂解细胞壁并溶解蛋白质，而蛋白酶K则能够降解核酸外侧的核

蛋白质。

4. 分离DNA

将上述混合液加入等体积的氯仿中，轻轻摇晃后放置静置。此时，

DNA会在上层形成白色的沉淀，而RNA和蛋白质则会在下层。使用

移液管将上层沉淀转移到新的离心管中，并加入70%的乙醇进行洗涤。

最后将DNA沉淀干燥即可。

5. 检测DNA

使用紫外分光光度计或琼脂糖凝胶电泳检测提取得到的DNA。如果需

要保存DNA，则应将其溶于TE缓冲液中，并放置于-20℃冰箱中保存。

注意事项：

1. 样品制备时应避免污染，使用无菌操作器材。

2. 细胞裂解时应注意温度和时间的控制，避免过度裂解或过短时间裂

解。

3. 在分离DNA时应注意不要将底部物质搅拌到上层沉淀中。

4. 检测DNA时应注意样品的稀释和纯化程度，避免误判结果。

总之，CTAB法是一种简单、高效、适用范围广的DNA提取方法。在

实际操作中，应严格控制每个步骤的条件和操作方法，以确保提取得

到高质量的DNA。