2024年5月2日发(作者：万能声卡驱动安装包)

MTT方法检测细胞毒性实验案例介绍

原理：MTT分析法以代谢还原噻唑蓝3-(45-dimethylthiazol-2-yl)-25-diphenyl

tetrazolium bromide (MTT)为基础。活细胞的线粒体中存在与NADP相关的脱氢酶，

可将黄色的MTT还原为不溶性的蓝紫色的甲月赞（Formazan），死细胞此酶消失，

MTT不被还原。 用DMSO溶解Formazan后可用酶标仪在570nm(450nm)波长处检测

光密度。

操作步骤：在96孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2细胞培养箱

培养24小时；加入适当浓度的受试化合物；将96孔板在37℃，含5% CO2空气及

100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间；将5×MTT用 Dilution Buffer稀释成1×

MTT；每孔加50μL 1× MTT，在37℃孵育4小时，使MTT还原为甲月赞；吸出上清

液，每孔加150μL DMSO使甲月赞溶解，用平板摇床摇匀；酶标仪在570nm波长处

检测每孔的光密度。

结果分析：细胞存活率% =（加药细胞OD-本地OD/对照细胞OD-本地OD）×100％。

注：本底OD值（完全培养基加MTT，无细胞）

0h 570nm波长各孔OD值：

实验分组

A

B

本底

实验分组

A

B

本底

实验分组

A

B

本底

实验分组

样品

0.457

0.461

0.007

样品

0.503

0.494

0.009

样品

0.618

0.573

0.007

样品

平行样品

0.452

0.448

0.009

平行样品

0.518

0.501

0.012

平行样品

0.607

0.566

0.008

平行样品

平行样品

0.463

0.454

0.010

平行样品

0.511

0.489

0.011

平行样品

0.624

0.584

0.008

平行样品

平均值

0.457

0.454

0.009

平均值

0.511

0.495

0.011

平均值

0.616

0.574

0.008

平均值

12h 570nm波长各孔OD值：

24h 570nm波长各孔OD值：

48h 570nm波长各孔OD值：

A

B

本底

实验分组

A

B

本底

0.744

0.636

0.009

样品

0.821

0.701

0.013

0.765

0.663

0.008

平行样品

0.817

0.724

0.008

0.738

0.657

0.008

平行样品

0.834

0.695

0.009

0.749

0.652

0.008

平均值

0.824

0.707

0.010

72h 570nm波长各孔OD值：