2024年3月12日发(作者：华为c8813q怎么刷机)

AKT/PKB信号通路蛋白质磷酸化检测抗体芯片（PAB216）

•

•

•

•

•

产品介绍

Ser/Thr蛋白激酶AKT（v-Akt Murine Thymoma Viral Oncogene）又名PKB (Protein Kinase-B)，在细胞因子、生长因子、荷

尔蒙及分裂素等胞外信号分子与RTKs（Receptor Tyrosine Kinase）结合引起的下游信号转导过程中起着核心作用。AKT/PKB

信号通路激活主要引起抗凋亡和促细胞增殖效应，进而在转录因子调节、蛋白合成、细胞周期、凋亡与代谢中发挥关键作用。

AKT/PKB信号通路与NF-кB、ERK、JNK、Apoptosis等信号通路密切相关，在2型糖尿病、肿瘤等疾病的病理发展中的作用

日益明确。

AKT/PKB通路蛋白质磷酸化检测抗体芯片（PAB216） ，采用三维高分子膜专利技术，在片基上共价结合216种高特异抗

体，并运用特有的荧光标记技术进行样本标记，以实现对AKT/PKB经典信号通路的高覆盖检测。芯片提供信号蛋白多个关键

磷酸化位点的同步检测，针对每一个特定蛋白磷酸化位点，设置一对抗体分别检测其磷酸化（Phospho）和非磷酸化

（non-Phospho）状态。同时，芯片可检测多种已有文献报道的非AKT/PKB经典通路的信号蛋白，极大扩展AKT/PKB单一信

号通路研究的延伸性。

检测特点：

1. 芯片规格为76 x 25 x 1 mm；

2. 实现单一信号通路全面筛选；

3. 每种抗体设置6次技术重复；

4. 适用于组织、细胞等多类型样本；

5. 5×106

细胞、200 µg总蛋白量即可满足实验；

6. 每个检测位点设有磷酸化和非磷酸化配对抗体；

7. 可通用于人、小鼠、大鼠等多类型模式生物检测。

检测原理：

检测列表：

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

14-3-3 theta/tau (Ser232)

14-3-3 ζ (Ser58)

14-3-3 ζ/δ (Thr232)

PFKFB2 (Ser483)

AKT (Ser473)

AKT (Thr308)

AKT (Tyr326)

AKT1 (Ser124)

AKT1 (Ser246)

AKT1 (Thr450)

AKT1 (Thr72)

•

FOXO1/3/4-PAN

(Thr24/32)

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

p53 (Ser378)

p53 (Ser392)

p53 (Ser46)

p53 (Ser6)

p53 (Ser9)

p53 (Thr18)

p53 (Thr81)

p70S6K (Ser371)

p70S6K (Ser411)

p70S6K (Ser418)

p70S6K (Ser424)

•

•

FOXO1A (Ser329)

FOXO1A/3A

(Ser322/325)

•

•

•

•

•

•

Gab1 (Tyr627)

Gab1 (Tyr659)

Gab2 (Tyr643)

GABA-RB (Ser434)

GSK3a-b (Tyr216/279)

GSK3α (Ser21)

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

AKT1 (Tyr474)

AKT1S1 (Thr246)

AKT2 (Ser474)

BAD (Ser112)

BAD (Ser134)

BAD (Ser136)

BAD (Ser155)

BAD (Ser91/128)

BCL-2 (Ser70)

BCL-2 (Ser87)

BCL-2 (Thr56)

BCL-2 (Thr69)

BIM (Ser69/65)

Cyclin D1 (Thr286)

eNOS (Ser1177)

eNOS (Ser615)

eNOS (Thr495)

FAK (Ser910)

FAK (Tyr397)

FAK (Tyr407)

FAK (Tyr576)

FAK (Tyr861)

FAK (Tyr925)

FKHR (Ser256)

FKHR (Ser319)

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

GSK3β (Ser9)

IKK α (Thr23)

IKKa/b (Ser180/181)

IRS-1 (Ser1101)

IRS-1 (Ser307)

IRS-1 (Ser312)

IRS-1 (Ser323)

IRS-1 (Ser612)

IRS-1 (Ser636)

IRS-1 (Ser639)

IRS-1 (Ser794)

JAK1 (Tyr1022)

LYN (Tyr507)

MDM2 (Ser166)

mTOR (Ser2448)

mTOR (Ser2481)

mTOR (Thr2446)

p21Cip1 (Thr145)

p27Kip1 (Ser10)

p27Kip1 (Thr187)

p53 (Ser15)

p53 (Ser20)

p53 (Ser315)

p53 (Ser33)

p53 (Ser366)

p53 (Ser37)

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

•

p70S6K (Thr229)

p70S6K (Thr389)

p70S6K (Thr421)

p70S6K-β (Ser423)

Paxillin (Tyr118)

Paxillin (Tyr31)

PDK1 (Ser241)

PI3Kα (Tyr607)

PI3K α/γ (Tyr467/Tyr199)

PIP5K (Ser307)

PP2A-a (Tyr307)

PTEN (Ser370)

PTEN (Ser380)

PTEN (Ser380/Thr382/Thr383)

RapGEF1 (Tyr504)

RPS6(Ser235)

SYK (Tyr323)

SYK (Tyr348)

SYK (Tyr525)

SYN1-Synapsin1 (Ser62)

Tuberin/TSC2 (Ser939)

Tuberin/TSC2 (Thr1462)

WEE1 (Ser642)

XIAP (Ser87)

相关文献：

1. Jia D, et ication of MPZL1/PZR promotes tumor cell migration through Src-mediated phosphorylation of

cortactin in hepatocellular carcinoma

.

Cell Res, 2014, (24):204-217. (上海仁济医院)

2. Ding Y, et al. Seed-targeting anti-miR-21 inhibiting malignant progression of retinoblastoma and analysis of their

phosphorylation signaling Eye Res,2014. (暨南大学)

3. Dong S, et al. The REGγ Proteasome Regulates Hepatic Lipid Metabolism through Inhibition of Autophagy. Cell

Metab, 2013, 18(3): 380-391. （华东师范大学）

4. Li L et al. REGγ deficiency promotes premature aging via the casein kinase 1 Natl Acad Sci

USA. 2013; June 13. （华东师范大学）

5. Jin L et al. p90 RSK2 Mediates Antianoikis Signals by both Transcription-Dependent and -Independent

Mechanisms. Mo Cell Biology. 2013; 33(13): 2574-2585.

6. Iwata J et al. Noncanonical Transforming Growth Factor β (TGFβ) Signaling in Cranial Neural Crest Cells Causes

Tongue Muscle Developmental Defects. J. Biol Chem. 2013; 288: 29760-29770.

7. Izzotti A et al. Relationships between pulmonary microRNA and proteome profiles, systemic cytogenetic damage,

and lung tumors in cigarette smoke-exposed mice treated with chemopreventive agents. Carcinogenesis. 2013;

May 24.

8. Xu N et al. Activation of RAW264.7 mouse macrophage cells in vitro through treatment with recombinant ricin

toxin-binding subunit B: Involvement of protein tyrosine, NF-κB and JAK-STAT kinase signaling pathways. Int J

Mol Med. 2013; 32(3): 729-735. （吉林大学）

9. Li F et al. Superoxide Mediates Direct Current Electric Field-Induced Directional Migration of Glioma Cells through

the Activation of AKT and ERK. PLoS ONE. 2013; 8(4): e61195. （第三军医大学）

10. Cui WY et al. Identification and Characterization of Poly(I:C)-induced Molecular Responses Attenuated by

Nicotine in Mouse Macrophages. Mol Pharmacol. 2013; 83:61-72. （浙江大学）

11. Shin D. M., et al. Chemoprevention of head and neck cancer by simultaneous blocking of epidermal growth factor

receptor and cyclooxygenase-2 signaling pathways: preclinical and clinical studies. Clin Cancer Res. 2013; 19(5):

1244-1256.

12. Eke I et al. EGFR/JIP-4/JNK2 signaling attenuates Cetuximab-mediated radiosensitization of squamous cell

carcinoma cells. Cancer Research. 2013; 73(1):297-306.

13. Fan H et al. Cardioprotective Effects of Salvianolic Acid A on Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury In Vivo and

In Vitro. Evid Based Complement Alternat Med. 2012; 508938. （烟台大学）

14. Zhang YM et al. A novel angiogenesis inhibitor impairs lovo cell survival via targeting against human VEGFR and

its signaling pathway of phosphorylation. Cell Death Dis. 2012; 3: e406. （西安交通大学）

15. Saccà SC et al. New proteins as vascular biomarkers in primary open angle glaucomatous aqueous humor. Invest

Ophthalmol Vis Sci. 2012; 28, 53(7):4242-53.

16. Makishima H et al. CBL mutation-related patterns of phosphorylation and sensitivity to tyrosine kinase

inhibitors. Leukemia. 2012; 26(7):1547-54.

17. Bernier M et al. Negative regulation of STAT3 protein-mediated cellular respiration by SIRT1 protein.J Biol

Chem. 2011; 286(22): 19270-19279.

18. Yu Y et al. Cellular Iron Depletion Stimulates the JNK and p38 MAPK Signaling Transduction Pathways,

Dissociation of ASK1-Thioredoxin, and Activation of ASK1. J Biol Chem, 2011; 286: 15413-15427.

19. Hu Y, Pioli P D, Siegel E, et al. EFEMP1 suppresses malignant glioma growth and exerts its action within the

tumor extracellular compartment. Mol Cancer, 2011, 10: 123.

20. Li Hui et al. Increased prevalence of regulatory T cells in the lung cancer microenvironment: a role of thymic

stromal lymphopoietin. Cancer Immunology Immunotherapy. 2011; 60(11): 1587-1596. （天津医科大学）

21. Izzotti A et al. Proteome Alterations in Primary Open Angle Glaucoma Aqueous Humor. J Proteome Res. 2010; 9

(9): 4831-4838.

22. Kang S et al. p90 ribosomal S6 kinase 2 promotes invasion and metastasis of human head and neck squamous

cell carcinoma. J Clin Invest

PI3K/Akt/mTOR信号通路

关键词： 信号通路 抑制剂 细胞 2012-07-17 00:00 来源：互联网 点击次数：3767

目的：通过特异性阻断PI3K和mTOR，观察HepG2和Hep3B细胞株PI3K/Akt/mTOR信号

通路活性及生物学行为的改变，探讨相关的分子机制。

方法：在培养的HepG2、Hep3B人肝癌细胞株和人正常肝细胞株QSG-7701上，以免疫印

迹方法（Western blot）检测各细胞株中PI3K（p110α亚单位）、PTEN、pAkt（S473，T308）

和p-mTOR（S2448）的表达情况；分别用 PI3K抑制剂LY294002（50μmol/ml）和mTOR

抑制剂Rapamycin（RAPA，50 nmol/ml）孵育HepG2和Hep3B细胞，以MTT比色法检测

细胞的增殖能力，以流式细胞术（Flow cytometry）检测细胞周期和凋亡情况，以Western blot

法检测细胞中pAkt（S473，T308）和p-mTOR（S2448）的表达改变。

结果：PTEN在HepG2和Hep3B细胞中基本无表达，在QSG-7701细胞株中高表达，pAkt

和p-mTOR在HepG2和Hep3B细胞中的 表达较QSG-7701细胞均显著升高；LY294002和

RAPA均呈剂量-时间依赖的抑制HepG2和Hep3B细胞生长。饱和效应浓度的 LY294002和

RAPA作用24小时后，HepG2和Hep3B细胞均呈现明显的G0/G1期阻滞，处于S期的细

胞比例较对照组显著减少 （P<0.01）；两给药组中HepG2细胞和Hep3B细胞的凋亡率与对

照组比较均显著增加（P<0.01）；两给药组HepG2细胞的凋 亡率显著高于Hep3B细胞（P<0.01

或P<0.05），并且HepG2细胞的凋亡率在RAPA给药组显著高于LY294002给药组 （P<0.01），

但Hep3B细胞的凋亡率在两组间无显著差异。饱和效应浓度的LY294002作用48小时后，

HepG2和Hep3B细胞中 pAkt（T308，S473）和p-mTOR（S2448）的表达水平较对照组均

显著降低（P<0.01），饱和效应浓度的RAPA作用48小时 后，HepG2和Hep3B细胞中P-mTOR

（S2448）的表达水平较对照组均显著降低（P<0.01），而pAkt（T308，S473）的 表达水平

较对照组均显著升高（分别P<0.01）。

结论：（1）HepG2和Hep3B细胞存在PI3K/Akt/mTOR信号通路的组成性激活；（2）LY294002

和RAPA能有效阻断HepG2和 Hep3B细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路，抑制HCC细胞的生

长增殖，诱导细胞周期阻滞，促进细胞凋亡，且阻断效应与HCC细胞P53的表达有 关；（3）

一定浓度范围内，HepG2细胞对PI3K/Akt/mTOR信号通路阻断剂的敏感性高于Hep3B细胞，

RAPA对PI3K/Akt /mTOR信号通路的部分阻断效应优于LY294002。

目的：观察阿霉素（Doxorubicin，DOX）单用或与RAPA联合用药对HepG2和Hep3B细胞

生物学行为及PI3K/Akt/mTOR信号通路活性的影响，探讨mTOR抑制剂增强HCC化疗药

物疗效的相关作用机制。

方法：分别取对数生长期的HepG2和Hep3B细胞，以不同浓度的DOX单用或与RAPA（20

nmol/ml）联合应用培养48h或24h，以MTT法测定药物对HepG2和Hep3B细胞的增殖抑

制作用，以流式细胞技术检测二者的凋亡情况，以 Western blot法检测者P-p70S6K（T389）、

P-4E-BP1（S65）和pS6（S235/236）的表达改变。

结果：0.156～2.5 mg/L浓度范围内，DOX能抑制HepG2和Hep3B细胞的增殖，且呈浓度

依赖性；DOX在0.625～10mg/L浓度范围内，Hep3B细胞的相 对存活率显著大于HepG2

细胞（P<0.01）；与DOX单用比较，DOX（0.156～2.5mg/L）与RAPA联用显著降低了HepG2

和 Hep3B细胞的存活率（P<0.01或P<0.05），DOX（0.156～10mg/L）与RAPA联用，Hep3B

细胞存活率显著大于 HepG2细胞（P<0.01）。DOX（0.156～10mg/L）单用或与RAPA联用

24h均可诱导HepG2和Hep3B细胞凋亡发生，且 随DOX浓度增加，凋亡牢升高；与DOX

单用比较，DOX（1.25～10mg/L）与RAPA联用，HepG2细胞捌亡率较显著升高 （P<0.01

或P<0.05），DOX（2.5～10 mg/L）与RAPA联用，Hep3B细胞凋亡率显著升高（分别P<0.05）；

DOX（5.0～10mg/L）单用，HepG2细胞凋亡率显著大 于Hep3B细胞（分别P<0.05），DOX

（2.5～10 mg/L）与RAPA联用，HepG2细胞凋亡率显著大于Hep3B细胞（分别P<0.01）。

RAPA（20nmol/L）、DOX（2.5mg /L）以及二者联用均可导致HepG2或Hep3B细胞P-p70S6K

（T389）、P-4E-BP1（S65）和pS6（S235/236）表达减 少，且以DOX与RAPA联用效应

最为明显。

结论：（1）DOX可抑制HepG2和Hep3B细胞生长增殖，促进细胞凋亡，下调PI3K/Akt/mTOR

信号通路的活化程度；（2）DOX与 RAPA联合用药能显著抑制HepG2和Hep3B细胞的增

殖，促进细胞凋亡，下调PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度，并在一定浓度范围内表 现

出协同效应；（3）在一定浓度范围内，HepG2细胞对DOX单用或与RAPA联合用药的敏感

性显著高于Hep3B细胞，可能与HCC细胞p53的表达 差异有关。

目的：分析人HCC组织中PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化水平与p53的表达及HCC临床

病理参数之间的关系，评估PI3K/Akt/mTOR信号通路在HCC诊断和预后评价中的作用。

方法：76例HCC组织样本经临床病理分期分级后，以免疫组织化学方法检测HCC组织和

癌旁组织中p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6的表达情况，分析上述指标在不同HCC病

理特征条件下的阳性表达率，并与正常肝组织比较。

结果：p53、pAkt、PTEN、p-mTOR和pS6在人HCC组织有不同程度的表达，HCC组织p53

（60.5％，46/76）、 pAkt（92.1％，70/76）、p-mTOR（84.2％，64/76）和pS6（88.2％，67/76）

的阳性表达比例较癌旁肝组织（分别为 10.5％，8/76、63.2％，48/76、46.1％，35/76、52.6％，

40/76）和正常肝组织（分别为0％、55.0％，11/20、 50.0％，10/20、45.0％，9/20）显著

升高（P<0.01），而PTEN（65.8％，50/76）的阳性表达比例较癌旁肝组织 （89.5％，68/76）

和正常肝组织（85.0％，17/20）显著减少（P<0.05）；p53阳性表达HCC组织pAkt、p-mTOR

和 pS6的阳性表达率较p53阴性表达组织显著升高（P<0.01），而PTEN的阳性表达率较p53

阴性表达组织显著降低（P＜0.01）。低分 化、存在血管侵袭、TNM分期高的HCC组织p53、

pAkt、p-mTOR和pS6的阳性表达率较相对应的分化较好、无血管侵袭、TNM分期低的HCC

组织显著升高（分别P<0.01或P<0.05）；而PTEN的阳性表达率显著降低（分别P<0.01或

P<0.05）。

结论：（1）人HCC组织存在PI3K/Akt/mTOR信号通路的激活；（2）人HCC组织

PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与p53的表 达可能有相关性；（3）人HCC组织

PI3K/Akt/mTOR信号通路的活化程度与HCC的临床病理特征有关，活化程度越高的HCC

其分化程度越低、血管侵袭多发、TNM分期高。