2024年4月4日发(作者:)
目录
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序列信息提取 .................................................................................................................................................................................................. 2
Gene Ontology (GO)功能注释 ............................................................................................................................................................ 2
2.1
2.2
2.3
2.4
2.5
2.6
3
4
序列比对(BLAST) ............................................................................................................................................................................ 2
GO功能条目提取(Mapping) ...................................................................................................................................................... 2
功能注释(Annotation) .................................................................................................................................................................. 3
补充注释(Annotation augmentation) .................................................................................................................................... 3
GO功能注释统计 ................................................................................................................................................................................. 3
GO Slim注释与统计 ........................................................................................................................................................................... 4
KEGG通路注释............................................................................................................................................................................................... 5
蛋白质相互作用网络分析.............................................................................................................................................................................. 6
References ................................................................................................................................................................................................................ 8
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1 序列信息提取
原始数据中质谱鉴定成功的蛋白质共计695个,序列信息批量提取自UniProtKB数据库,以FASTA格式保存
()。
2 Gene Ontology (GO)功能注释
基因本体 (Gene Ontology) 是一个标准化的基因功能分类体系,提供了一套动态更新的标准化词汇表,并以此从三个方面描述
生物体中基因和基因产物的属性:参与的生物过程 (Biological Process),分子功能 (Molecular Function) 和细胞组分
(Cellular Component)
1
。
2.1 序列比对(BLAST)
我们利用本地化序列比对软件NCBI BLAST+(ncbi-blast-2.2.28+-)将鉴定到的蛋白质与 SwissProt Mammals数
据库中的蛋白质序列进行比对。根据相似性原理,所得的同源蛋白的功能信息可以用于目标蛋白的功能注释。我们仅保留排名前
10条且E-value ≤ 1
e-
3的比对序列进行后续的分析(表中sheet TopBlastHits)。所得的比对相似性范围为36-
100% ,其中大部分目标蛋白序列的比对相似性为90% 或以上(图1)。
图1 序列比对相似性分布
2.2 GO功能条目提取(Mapping)
BlastGO
2
是一个用于基因/蛋白质功能注释和数据分析的应用软件。我们利用Blast2GO(Version 2.7.1)中的Mapping功能
对所有鉴定成功的蛋白的比对序列所关联的GO功能条目进行提取,共提取到与其中692个鉴定成功的蛋白序列(99.6%)相
关的21,078条GO功能条目。
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